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使用Invitrogen转染试剂需要注意什么?

发布时间:2022-09-13      点击次数:89
   Invitrogen转染试剂在细胞转染、细胞识别、抗体蛋白研发等领域广泛使用,通常可以直接购买或者过实验室中DIY配制。Lipofectamine、fugene、磷酸钙、是较为常见的转染试剂,其实目前市场上的转染试剂盒针对某些转染进行了优化,使用起来较为方便。
  
  由于省掉了电转杯,转染过程也更为简化:只需将细胞和核酸吸入Neon移液器吸头中,再插入到移液器吸头架上,并按“Start”即可。转染过后,直接将细胞加入培养容器中。既没有繁琐的移液,也不需要清洗电转杯。而且,通用的试剂盒适用于所有细胞类型,不用购买多个试剂盒,也无需鉴定最佳缓冲液。当然,一次性使用的24K金电极吸头成本不低。因多次使用会导致金包被变薄,改变吸头的电导率,所以每个吸头最多只能使用两次。
  
  使用Invitrogen转染试剂需要注意什么?
  1、转染操作时,以细胞融合度达90%-95%为佳;
  2、使用高纯度的DNA有助于获得较高的转染效率;
  3、制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂;
  4、转染的时候培养基中不能添加抗生素;
  5、试剂应该在4度保存,要注意避免多次反复长时间开盖;
  6、初次使用应优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂量以得到最大的转染效率。DNA和转染试剂的比例,通常推荐是1:2-1:3。
  
  转染后需要进行终止吗?
  不需要。脂质体复合物可以稳定存在6个小时。如果在进行转染前没有进行细胞换液,为了保证细胞正常生长所需的营养,需要在4~6小时后换用新的培养基。但如果转染之前已进行过换液,则在脂质体转染后不需要进行再次换液。
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