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Duolink® PLA流式蛋白检测试剂盒的介绍

更新时间:2023-11-21      点击次数:317

传统流式细胞术在蛋白质互作和低丰度蛋白检测方面能力受限。我们将流式细胞术与Duolink®邻位连接技术(PLA)结合在一起,实现了蛋白互作流式分析。Duolink® flowPLA检测试剂盒通过增强灵敏度可以检测细胞群中的低丰度靶蛋白。该实验方案易于操作,可适配任意流式细胞仪来提供可直接发表的实验结果。

Duolink® flowPLA检测试剂盒可进行40次反应,每次需100,000细胞溶于100 µL反应液中。试剂盒组分包含:

1.连接原液(5X) – 稀释配制1X连接缓冲液

2.连接酶(1 U/μL) – 添加配制连接液

3.扩增原液(5X) – 稀释配制1X扩增缓冲液

4.聚合酶(10 U/μL) – 添加配制扩增液

5.检测原液(5X) – 稀释配制1X检测缓冲液

Duolink®邻位连接检测(PLA)实现了对内源性蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)和翻译后修饰的研究,为单一事件提供了可通过显微镜或流式细胞仪进行可视化的荧光信号。为了实现对蛋白质间相互作用的研究,Duolink® PLA技术使用了一对带有寡核苷酸标记的抗体,当它们相距在40nm以内时,可进行滚圈扩增并在添加标记探针后产生特异性荧光信号。

Duolink® PLA可提供四种不同颜色的荧光用于流式细胞仪和显微镜检测,对细胞中多组蛋白质间的相互作用实现可视化。借助Duolink® PLA技术的放大能力和诸多优势,发现任何科研突破机会:

1.可视化蛋白互作——包括稳定和瞬时两种

2.可视化翻译后修饰

3.检测内源蛋白——无需表达或遗传操作

4.高特异性——使用两种抗体/探针消除假阳性

5.无需特殊设备——可提供基于标准免疫荧光和流式细胞术的方法

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