DeNovix 自动细胞计数仪应用要点

　　DeNovix 自动细胞计数仪应用需聚焦样本处理、参数设置及结果验证，核心是确保计数精准、数据可靠，以下是关键应用要点：
 

　　一、样本制备核心要点
 

　　细胞悬液制备：确保细胞充分分散，避免团聚。贴壁细胞需用胰酶等试剂温和消化，终止后轻柔吹打 10-15 次；悬浮细胞直接吹打混匀，必要时用 200 目筛网过滤去除杂质和大团聚体。
 

　　浓度调节：计数前需将细胞浓度调整至仪器检测范围(通常 1×10⁴ - 1×10⁷ cells/mL)。浓度过高需用对应培养基稀释，过低则可通过离心浓缩，稀释时采用梯度稀释法，保证稀释比例准确。
 

　　染色处理(可选)：活死细胞区分需使用台盼蓝或 AO/PI 染色液，按 1:1 比例与细胞悬液混合，染色时间控制在 1-5 分钟，避免染色过度影响计数准确性。
 

　　二、仪器操作关键规范
 

　　样本加载：取 10μL 制备好的细胞悬液，缓慢滴加至计数板中央，避免产生气泡。加载后静置 30 秒，让细胞充分沉降至计数区域，再将计数板放入仪器样品台。
 

　　参数设置：根据细胞类型选择对应模板(如哺乳动物细胞、酵母细胞)，手动调整细胞直径范围(通常 5-30μm)，设置活死细胞判别阈值。若使用自定义染色，需匹配对应荧光通道和激发波长。
 

　　重复计数验证：同一批次样本至少进行 3 次平行计数，每次更换新的细胞悬液进行加载，取平均值作为最终结果，减少偶然误差。
 

　　三、结果解读与质量控制
 

　　数据有效性判断：查看仪器输出的细胞分布图，确保细胞无明显团聚、无边缘堆积，计数区域内细胞数量在 50-500 个之间(数量过少或过多需调整浓度重测)。
 

　　异常结果排查：若活细胞率异常偏低，需检查染色液是否失效、细胞是否受到污染或损伤；若计数结果波动过大，需重新制备样本，检查仪器计数板是否清洁。
 

　　数据导出与追溯：计数完成后按实验需求导出数据(支持 Excel、PDF 格式)，标注样本信息、检测时间及仪器参数，便于实验追溯和数据对比。
 

　　四、应用场景适配要点
 

　　常规细胞培养监测：适用于贴壁 / 悬浮细胞的浓度监测和活死率评估，可快速反馈细胞生长状态，指导传代、冻存或实验接种时机。
 

　　细胞治疗与生物制药：严格遵循 GMP 相关要求，使用校准合格的仪器，定期进行方法学验证，确保细胞计数结果符合临床或生产标准。
 

　　微生物计数(部分型号)：针对酵母、细菌等微生物，需选择对应检测模块，搭配专用染色液，调整细胞大小阈值，避免与杂质混淆。