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pcr耗材类型及功能解析

更新时间:2026-02-09      点击次数:14
   聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是分子生物学中基础且广泛应用的技术之一,用于特异性扩增目标DNA片段。尽管PCR仪和试剂是核心要素,但实验的顺利进行同样高度依赖一系列专用耗材。这些pcr耗材不仅影响反应效率和特异性,还直接关系到实验的重复性、防污染能力及数据可靠性。根据PCR实验流程,主要耗材可分为以下几类:
  一、反应容器类
  1. PCR管(单管)
  通常为0.2 mL或0.5 mL容量的薄壁塑料管,材质多为高纯度聚丙烯(PP),具有良好的热传导性和耐高温性能。常见有平盖、凸盖或带O型圈密封设计,适用于普通PCR或对密封性要求较高的实验。
  2. PCR八联管
  由8个相连的PCR管组成,可整排使用或按需剪开,便于批量加样和在PCR仪中整齐排列。配套的光学平盖或圆盖需与仪器适配,尤其在实时荧光定量PCR中,平盖可确保光路通透。
  3. PCR板(96孔板、384孔板)
  用于高通量PCR或qPCR实验。96孔板较为常用,材质透明或白色。部分板型带有裙边,以匹配不同型号的PCR仪和自动化工作站。
  二、封板与密封材料
  1. PCR管盖/八联管盖
  与管体配套,确保热循环过程中不蒸发、不泄漏。qPCR须使用光学透明盖,以允许激发光穿透并检测荧光信号。
  2. 封板膜
  用于PCR板的密封,包括:
  粘性封板膜:手动按压贴合,适用于普通PCR;
  热封膜:需用热封仪密封,密封性更强,适合长时间反应或运输;
  光学透明膜:专用于qPCR,具备高透光率和低自发荧光。
  三、移液与加样耗材
  1. 微量移液器吸头(Tip)
  通常为10 μL、200 μL、1000 μL规格,要求无DNA酶、RNA酶、无热原。为防止气溶胶污染,推荐使用带滤芯吸头,尤其在模板加样和阳性对照操作中。
  2. 低吸附吸头
  内壁经特殊处理,减少核酸或蛋白在吸头内壁的残留,适用于低浓度模板的精准转移。
 

pcr耗材

 

  四、辅助与前处理耗材
  1. 离心管(1.5 mL/2.0 mL EP管)
  用于试剂分装、模板稀释或反应体系预混。同样需为无酶、无污染级别。
  2. 磁力架与磁珠管
  在基于磁珠的核酸提取后直接用于PCR模板制备,部分实验采用“提取-扩增”一体化流程,此时磁珠管也属于广义PCR耗材。
  3. 冰盒或冷却模块
  虽非一次性耗材,但在配制反应体系时用于保持酶和模板低温,避免提前启动反应。
  五、防污染与质量控制用品
  1. 阴性对照与阳性对照管
  虽属试剂范畴,但常与专用PCR管配套使用,作为实验质控的一部分。
  2. 工作区隔离用品
  如一次性实验服、手套、口罩、PCR专用工作台面垫等,虽不直接参与反应,但对防止外源DNA污染至关重要。
  六、特殊应用耗材
  1. 数字PCR(dPCR)芯片或微滴生成管
  用于dPCR平台,如微流控芯片、油包水微滴反应管等,属于高精度专用耗材。
  2. RT-PCR专用管
  部分逆转录步骤与PCR在同一管中完成,需耐受更宽温度范围。
  使用注意事项
  所有耗材应储存在清洁、干燥环境中,避免阳光直射;
  开封后建议短期内用完,防止吸潮或污染;
  不同品牌耗材在尺寸、密封性、光学性能上可能存在差异,更换品牌时需验证兼容性;
  严禁重复使用,以防交叉污染和信号衰减;
  废弃的PCR管、吸头等应按生物安全规范处理,尤其涉及病原体样本时。
  结语
  合理选择、规范使用并注重pcr耗材细节管理,不仅能提高扩增效率和数据准确性,还能有效降低假阳性或假阴性风险。在日常实验中,将耗材质量纳入整体实验设计考量,是实现可靠、可重复分子检测的重要前提。
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