您好!欢迎访问上海牧荣生物科技有限公司网站!
咨询热线

17621170138

当前位置:首页 > 技术文章 > allumiqs 磁珠核酸提取操作指南

allumiqs 磁珠核酸提取操作指南

更新时间:2026-04-13      点击次数:57
  allumiqs磁珠凭借高特异性结合、分离快速、纯度高的优势,广泛应用于实验室核酸(DNA/RNA)提取,适配血清、组织、细胞、痰液等多种样品类型,操作流程简洁,可实现高效纯化,以下为标准操作步骤及关键要点。
 
  一、实验前期准备
 
  1. 试剂准备
 
  核心试剂:allumiqs磁珠悬液(使用前充分颠倒混匀,确保磁珠均匀分散)、裂解液、结合液、洗涤液Ⅰ、洗涤液Ⅱ、洗脱液(无酶水或TE缓冲液)。
 
  试剂预处理:洗涤液需提前确认是否添加无水乙醇(按试剂说明书要求),所有试剂恢复至室温(20-25℃),避免温度影响结合效率。
 
  2. 仪器与耗材准备
 
  仪器:磁力架、移液器(10μL、100μL、1000μL)、离心机、恒温水浴锅(可选,用于样品裂解)。
 
  耗材:无酶离心管(1.5mL)、无酶吸头,所有耗材提前灭菌处理,避免核酸污染。
 
  3. 样品准备
 
  根据样品类型处理至均一状态(如组织研磨、细胞裂解),确保样品充分破碎,释放核酸;避免样品中含有大量杂质、蛋白或强抑制剂(如酚、氯仿)。
 
  二、标准操作步骤
 
  1. 样品裂解(关键步骤)
 
  取处理好的样品(200μL,可按比例调整)加入1.5mL无酶离心管中。
 
  加入200μL裂解液,颠倒混匀10-15次,室温放置5-10min(若为难裂解样品,可置于56℃水浴10min,期间颠倒混匀2-3次),确保样品完全裂解。
 
  2. 磁珠结合核酸
 
  向裂解后的样品中加入20μL allumiqs磁珠悬液(提前混匀),再加入200μL结合液,充分颠倒混匀30s,室温静置5min,使核酸与磁珠充分结合。
 
  将离心管置于磁力架上,静置1-2min,待磁珠完全吸附至管壁(溶液澄清),缓慢吸弃上清液(注意不要触碰磁珠)。
 
  3. 洗涤除杂(两次洗涤,去除杂质)
 
  保持离心管在磁力架上,加入500μL洗涤液Ⅰ,取下离心管,颠倒混匀10次,重新置于磁力架上,静置1min,吸弃上清液。
 
  重复上述操作,加入500μL洗涤液Ⅱ,颠倒混匀10次,磁力架吸附1min,吸弃上清液;用移液器轻轻吸尽管底残留液体(避免损伤磁珠)。
 
  4. 干燥磁珠(避免残留影响洗脱)
 
  保持离心管在磁力架上,开盖室温放置3-5min,直至磁珠完全干燥(无光泽、不粘壁),切勿过度干燥(否则会导致核酸洗脱效率下降)。
 
  5. 核酸洗脱(核心步骤)
 
  取下离心管,加入30-50μL洗脱液(无酶水或TE缓冲液),颠倒混匀10-15次,确保磁珠完全悬浮于洗脱液中。
 
  将离心管置于56℃水浴中孵育5min(可选,提升洗脱效率),期间颠倒混匀1次。
 
  将离心管放回磁力架,静置1-2min,待磁珠完全吸附,缓慢吸取上清液(含纯化核酸)至新的无酶离心管中,即可用于后续实验(PCR、测序等)。
 
  三、关键注意事项
 
  allumiqs磁珠使用前必须充分颠倒混匀,避免磁珠沉淀,影响结合效率;每次加样后需彻底混匀,确保反应充分。
 
  全程使用无酶耗材,操作过程中佩戴手套、口罩,避免人体毛发、皮肤分泌物污染核酸。
 
  洗涤步骤中,上清液需吸弃干净,残留洗涤液会抑制后续实验;干燥磁珠时,不可过度干燥,否则会导致核酸难以洗脱。
 
  洗脱液体积可根据需求调整(30-100μL),体积越小,核酸浓度越高;洗脱液建议现用现配,避免污染。
 
  提取后的核酸需置于-20℃保存,避免反复冻融;allumiqs磁珠需按说明书要求储存(通常4℃密封保存),避免阳光直射。
 
  若提取核酸纯度偏低,可增加一次洗涤步骤;若产量偏低,可延长磁珠结合时间或增加磁珠用量。
 
  四、常见问题提示
 
  1. 磁珠吸附不充分:检查磁力架是否正常,或磁珠是否失效;确保结合步骤混匀充分、静置时间足够。
 
  2. 洗脱后无核酸:可能是样品裂解不充分,或磁珠过度干燥,可重新处理样品或调整干燥时间。
 
  3. 核酸纯度低:样品杂质过多,可增加裂解时间或提前去除样品中的蛋白、杂质。
扫一扫,关注微信
地址:上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 传真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2026 上海牧荣生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2022017655号-1