生物发光生物的三类蛋白质具有独特的特性,这些特性作为细胞研究的报告基因、定义代谢途径以及极为重要的高通量筛选(HTS)非常有用。
荧光素催化荧光素底物(尤其是海腔素)的酶促氧化,并产生该反应的副产物发光。与第一代萤火虫荧光素酶系统不同,这些基于海腔enterazine的荧光素酶(NanoLight™)不需要辅助的高能分子如ATP或辅酶A,这大大简化了它们在多种报告应用中的应用。
其中一种特别小、最小且最亮的发酵素荧光素酶被称为Gaussia princeps Luciferase。通过多次出海航行,发现这些长约5毫米的小型桡足类,它们分布稀疏于700-900米深处。获得足够多完好无损的这些桡足类以制作功能性表达克隆库极其繁琐且昂贵。
高西亚·露西法拉酶的一个应用是观察单个神经元囊泡释放,从而可以直接且定量地成像去极化及胰岛素及其他融合蛋白的释放。
光蛋白(Aequorin、Obelin)被海腔素和分子氧“预充电"——当钙触发氧化时,会发生一道闪光。光蛋白通常需要还原环境和极低的钙含量,否则在钙存在下表现为较差的荧光素酶。
绿色荧光蛋白(NanoFluor™)本质上会发荧光,是由于一种独特的肽源发色团,该发色团在翻译后自我组装。GFPs能够将荧光素酶或光蛋白的波长从蓝色转变为绿色,这使得在基因表达的全细胞研究以及药物与靶点相互作用随时间和可变剂量下可视化等多种用途成为可能。
我们独特的GFP和荧光素酶特性使公司科学家获得了一期SBIR测试,以评估BRET(生物发光能量转移)作为新型生物传感器的可行性。BRET有望广泛应用于HTS、医学诊断和基础研究。其独特优势在于在结合或接近事件发生时,能够同时提供空间和方向信息。
一种notable sea pen GFPPtilosarcus被发现具有所有荧光蛋白中最高的自然量子效率。Ptilosarcus和Renilla GFP已被Cellomics优化并用于高含量筛选,并被分子器件公司和Rigel Pharmaceuticals采用。
纳米光技术认为,基础研究、药物发现和农化行业才刚刚开始利用自然生物发光的力量进行研究、筛选和发现工作。
标准光度计可测量的大部分可见光谱仍可利用,纳米光™具备开发生物发光报告系统的理想位置,并可轻松集成于ELISA检测系统、直接体内成像、细胞追踪,以及采用多种策略进行DNA-DNA、DNA-RNA和核苷酸-肽检测,以及分裂荧光素酶技术。使用纳米光技术生物发光技术的、稳固且不受现有技术限制,生命科学公司可以放心。
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