您好!欢迎访问上海牧荣生物科技有限公司网站!
咨询热线

17621170138

当前位置:首页 > 产品中心 > 化学试剂 > 分子生物化学试剂 > E0269hAobious 免疫测定试剂盒

Aobious 免疫测定试剂盒

简要描述:1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶ELISA试剂盒:上海牧荣生物代理Aobious在中国的业务,Aobious授权代理,Aobious代理,Aobious上海代理,Aobious华南代理,Aobious华东代理,Aobious华西代理,Aobious华北代理,Aobious 免疫测定试剂盒

  • 产品型号:E0269h
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2023-06-09
  • 访  问  量:886

相关文章

Related Articles

详细介绍

品牌Aobious供货周期一个月

Aobious 免疫测定试剂盒

1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶ELISA试剂盒


1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶ELISA试剂盒
目录号:E0269h

范围:0.156-10纳克/毫升


预期用途

该免疫测定试剂盒允许体外定量测定人1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸磷酸二酯酶γ-1、血清、血浆、尿液、组织匀浆和细胞培养上清液以及其他生物流体中的浓度。


测试原理

该试剂盒中提供的微量滴定板已经预先包被了特异性针对1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶γ-1的抗体。然后将标准品或样品加入适当的微量滴定板孔中,将对1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶γ-1特异的生物素偶联的多克隆抗体制剂和与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗生物素蛋白加入每个微量滴定板孔中并孵育。然后向每个孔中加入TMB底物溶液。只有那些含有1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶γ-1、生物素偶联的抗体和酶偶联的抗生物素蛋白的孔会显示颜色变化。通过加入硫酸溶液终止酶-底物反应,并用分光光度计在450nm±2nm的波长下测量颜色变化。然后通过将样品的外径与标准曲线进行比较来确定样品中的浓度。


材料和部件

试剂数量

检测板1

标准2

样本稀释液1×20毫升

检测稀释剂A 1×10毫升

检测稀释剂B 1×10毫升

检测试剂A 1 × 120μl

检测试剂B 1 × 120μl

洗涤缓冲液(25倍浓缩液)1×30毫升

底物1×10毫升

停止溶液1×10毫升

用于96孔的平板密封器5

说明1


所需的其他用品

酶标仪

移液器和移液器吸头

EP管

去离子水或蒸馏水


工具包的储存

检测板、标准品、检测试剂A和检测试剂B收到后应储存在-20℃下。收到试剂盒后,底物应始终保存在4℃下。其他试剂根据小瓶上的标签保存。但是为了长期保存,请将整个试剂盒保存在-20℃下。未使用的条带应保存在密封袋中,并提供干燥剂,以尽量减少暴露在潮湿空气中。检测试剂盒可在试剂盒的有效期内使用(自生产日期起六个月)。如果按照上述规定储存,打开的检测试剂盒将保持稳定,直到所示的失效日期。


样本收集和储存

血清-使用血清分离管(SST ),使样品凝结30分钟,然后以大约1000 × g的速度离心15分钟。取出血清并立即进行分析,或者等分并在-20℃或-80℃下储存样品。

血浆-使用EDTA或肝素作为抗凝剂收集血浆。在采集的30分钟内,将样品在2℃ - 8℃下以1000 × g离心15分钟。将样品储存在-20℃或-80℃下。避免反复冻融循环。

尿液——无菌收集当天的第一次尿液(中段),直接排入无菌容器。离心去除颗粒物质,立即化验或等分并储存在≤ -20℃下。避免反复冻融循环。

组织匀浆——组织匀浆的制备取决于组织类型。对于该分析,用1X PBS冲洗组织以去除多余的血液,在20mL 1X PBS中匀浆,并在≤ -20℃下储存过夜。在进行两次冻融循环以破坏细胞膜后,将匀浆以5000 x g离心5分钟。去除上清液并立即进行分析,或者等分并在≤ -20℃下储存。

细胞培养上清液和其他生物液体——通过离心去除颗粒,并立即进行分析,或在-20℃或-80℃下等分并储存样品。避免反复冻融循环。

注意:

5天内使用的样品可储存在2-8℃下,否则样品必须储存在-20℃ (1个月)或-80℃ (2个月),以避免生物活性损失和污染。
由于某些化学物质的影响,由化学裂解缓冲液制备的组织或细胞提取样本可能会导致意外的ELISA结果。
受包括细胞生存力、细胞数量以及取样时间等因素的影响,试剂盒可能无法检测到来自细胞培养上清液的样品
样本溶血会影响结果,因此不能检测溶血标本。
进行检测时,将样品缓慢置于室温。
不要使用热处理过的样品。

程序的局限性

AOBIOUS仅对试剂盒本身负责,但不对检测过程中消耗的样品负责。用户应计算整个测试中可能使用的样本量。请提前预留足够的样品。
试剂盒不得在超过试剂盒标签上的有效期后使用。
请勿将其他批次或来源的试剂混合或替换。
如果样本生成的值高于最高标准,用样本稀释剂进一步稀释样本,然后重复检测。标准稀释剂、操作员、移液技术、清洗技术、培养时间或温度以及试剂盒年限的任何变化都会导致结合的变化。

试剂制备

洗涤缓冲液-如果浓缩物中有晶体形成,加热至室温并轻轻混合,直到晶体溶解。将30毫升洗涤缓冲液浓缩物稀释到去离子或蒸馏水中,以制备750毫升洗涤缓冲液。
标准品-用1.0毫升样品稀释液重新配制标准品。这种复溶产生200 ng/mL的储备溶液。在进行系列稀释之前,让标准品静置至少15分钟,并轻轻搅动(不允许直接在孔中进行系列稀释)。未稀释的标准作为高标准(200 ng/mL)。样本稀释剂用作零标准(0 ng/mL)。

纳克/毫升200±100。50.0 25.0 12.5 6.25 3.12 0

检测试剂A和B -分别使用检测稀释剂A和B (1:100)稀释至工作浓度。


化验程序

让所有试剂达到室温(请勿直接在37℃溶解试剂)。移液前,应轻轻旋转,混合所有试剂。避免起泡。为一次实验保留适当数量的试纸条,并从微量滴定板上移除多余的试纸条。取出的试纸条应重新密封,并储存在4℃下,直至试剂盒到期。按照前面章节的说明准备所有试剂、工作标准和样品。请在化验前预测浓度。如果这些值不在标准曲线的范围内,用户必须为他们的特定实验确定最佳样品稀释度。


每孔添加100 μl标准品、空白或样品。用板密封器覆盖。在37℃下孵育2小时。
清除每个孔的液体,不要冲洗。向每个孔中添加100 μl检测试剂工作溶液。用板密封器覆盖。在37℃下孵育1小时。检测试剂A工作溶液可能会出现浑浊。升温至室温,轻轻混合,直到溶液变得均匀。
吸取每个孔并清洗,重复该过程三次,总共清洗三次。使用喷射瓶、多通道移液器、歧管分配器或自动清洗器,用清洗缓冲液(约400 μl)填充每个孔进行清洗。在每个步骤中去除液体对于良好的性能至关重要。最后一次清洗后,通过抽吸或倾析去除任何残留的清洗缓冲液。将盘子倒置,用干净的纸巾吸干。
向每个孔中加入100 μl检测试剂B工作溶液。用新的板密封剂覆盖。在37℃下孵育1小时。
重复步骤4中的抽吸/清洗。
向每个孔中加入90 μl底物溶液。用新的板密封剂覆盖。在37℃下孵育15-30分钟。避光。
向每个孔中加入50 μl终止液。如果颜色变化不均匀,轻敲平板以确保充分混合。
使用设置为450纳米的酶标仪,一次测定每个孔的光密度。

注意:

吸光度是孵育时间的函数。因此,在开始分析前,建议所有试剂在使用前应新鲜制备,并且所有需要的条形孔都固定在微量滴定框架中。这将确保每个移液步骤花费的时间相等,不会中断。
请根据说明小心地重新配制标准品或工作检测试剂A和B,避免起泡并轻轻混合,直到晶体溶解。复溶的标准检测试剂A和B只能使用一次。这种分析需要少量的移液。为了最大限度地降低移液造成的不精确性,请确保移液器经过校准。建议一次移液吸取10μl以上。
为了确保准确的结果,在培养步骤中,板密封器的适当粘附是必要的。在孵育步骤之间,不要让孔长时间无盖放置。一旦将试剂添加到孔板条中,在检测过程中的任何时候都不要让孔板条变干。
对于程序中的每个步骤,向检测板添加试剂的总分配时间不应超过10分钟。
为避免交叉污染,请在添加每个标准水平、添加样品和添加试剂之间更换移液器吸头。此外,每种试剂使用单独的容器。
清洗程序至关重要。清洗不充分会导致精度下降和吸光度读数错误升高。
尽管不要求,但建议复制所有标准和样本。
底物溶液容易被污染。请避光保存。


特征:该分析识别重组和天然人1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶γ-1。没有观察到明显的交叉反应或干扰。

注意:限于目前的技术和知识,我们不可能完成人与所有类似物之间的交叉反应检测,因此,交叉反应可能仍然存在。

探测距离:3.12-200纳克/毫升。


统计

平均每个标准品、对照品和样品的重复读数,并减去平均零标准光密度。使用能够生成四参数逻辑(4-PL)曲线拟合的计算机软件,通过减少数据来创建标准曲线。或者,通过在x轴上绘制每个标准的平均吸光度与y轴上的浓度来构建标准曲线,并通过图上的点绘制最佳拟合曲线。数据可以通过绘制1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶γ-1浓度的对数对O.D .的对数来线性化,并且最佳拟合线可以通过回归分析来确定。建议用一些相关的软件来做这个计算,比如曲线专家1.3。这个过程将产生一个适当的但不太精确的数据拟合。如果样品已经稀释,从标准曲线读取的浓度必须乘以稀释系数。

重要提示:

受目前条件和科学技术的限制,我们无法对供应商提供的原材料进行全面的鉴定和分析。因此,使用该试剂盒可能存在一些定性和技术风险
最终的实验结果将与产品的有效性、最终用户的操作技能和实验环境密切相关。请确保有足够的样品。
不同批次的试剂盒在检测范围、灵敏度和显色时间上可能略有不同。请严格按照试剂盒中的说明进行实验,而我们网站上的电子说明仅供参考。
第一次打开板时,孔中可能有一些模糊的物质。它不会对最终检测结果产生任何影响。
除非需要,否则不要从储存袋中取出微量滴定板。
带宽为10纳米或更小、在450纳米波长下光密度范围为0-3 OD或更大的微量滴定板读数器可用于吸光度测量。
每次转移时使用新的一次性移液器吸头,以避免污染。
请勿将试剂从一个试剂盒批次替换到另一个试剂盒批次。仅使用制造商提供的试剂。
即使是同一个操作员在两个不同的实验中也可能得到不同的结果。为了获得更好的重现性结果,应控制检测中每一步的操作。此外,建议在对每批产品进行检测前进行初步实验。
每个套件都经过严格的质量控制测试。然而,由于一些意外的运输条件或不同的实验室设备,最终用户的结果可能与我们的内部数据不一致。来自不同批次的试剂盒之间的测定内差异也可能由上述因素引起。
不同制造商生产的同一产品的试剂盒可能会产生不同的结果,因为我们没有将我们的产品与其他制造商的产品进行比较。
有效期:六个月。

预防

建议与该试剂盒一起使用的终止溶液是酸性溶液。使用这种材料时,戴上眼睛、手、脸和衣服防护装置。

典型数据

此图表数据作为示例显示。每次运行检测时,必须生成标准曲线。


AOBIOUS是一家小型但发展迅速的公司,为全球研究市场提供新的生物活性药物样小分子。自2014年以来,我们是该市场上在定价方面提供按需定量(QOD)服务的公司。我们也是自2016年以来提供MolCart(摩尔浓度计算车)订购产品的公司。客户可以选择使用QOD/摩尔卡购买任何数量或摩尔浓度的产品。

一般储存条件
在没有任何附加说明的情况下,我们所有的产品都应在4摄氏度的冰箱中短期储存2-6个月。

我们不建议客户将我们的产品长期存放在他们自己的地方,因为他们可以随时从我们这里订购他们需要的确切数量。

上海牧荣生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域,以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及,细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。Aobious 销售

AOBIOUS 是一家规模虽小但发展迅速的公司,为研究市场提供新的具有生物活性的类药物小分子

Aobious是在价格上提供 按需数量(QOD) 服务的公司。自2016年以来,我们是提供MolCart(摩尔计算推车?)订购产品的公司。客户可以选择使用QOD / MolCart购买任何数量或摩尔浓度的产品。 我们的使命是为科学家提供全新的购买研究化学品的经验,而无需花费大量的精力来询问价格或库存情况。如果您可以在我们的网站列表中找到该产品,我们将在当天通过FedEx隔夜送货服务将产品运送给您。 我们制造所有核心产品,此外,我们还提供其他来自可靠供应商的产品,这些产品可为市场上的所有OEM公司提供大量此类产品。

上海牧荣生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品货号现货供应,*,欲购从速(敬请咨询)

Aobious 免疫测定试剂盒 1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶ELISA试剂盒


产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
扫一扫,关注微信
地址:上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 传真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧荣生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2022017655号-1