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ATP-柠檬酸裂解酶(ATP-citrate lyase,ACL)试剂盒

简要描述:ATP-柠檬酸裂解酶(ATP-citrate lyase,ACL)试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-04-26
  • 访  问  量:99

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

ATP-柠檬酸裂解酶(ATP-citrate lyase,ACL)试剂盒


正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:                           

ACL(EC4.1.3.8)是脂肪酸合成中的关键酶,其催化产生的乙酰辅酶A可用于脂肪酸合成和碳链延长、黄酮类物质合成、氨基酸合成等。

测定原理:

ACL在ATP和辅酶A存在的情况下催化柠檬酸裂解为乙酰辅酶A、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸盐。苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+,在340nm测定NADH减少速率,计算ACL活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水

试剂组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;

试剂三:液体2μL×1支,4℃保存;

样本的前处理:

1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:

  1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

  2. 样本测定

(1)工作液的配置,将试剂二和试剂三转移至试剂一中,充分混合溶解,置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴5min;(注意:可取少量试剂一至试剂二和试剂三中,充分混匀溶解后转移至试剂一瓶中,重复2-3遍);用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本和190μL工作液,混匀,立即记录340nm处20s时的吸光值A1和 2min20s后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。

ACL活性计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1、血清(浆)ACL活力计算

单位定义:每毫升血清(浆)每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

ACL(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=1608×ΔA

2、组织、细菌或细胞中ACL活力计算

(1)按样本蛋白浓度计算

单位定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1nmol NADH定义为一个酶活力单位。

ACL(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1608×ΔA÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

ACL(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总)÷T=1608×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算:

单位定义:每1万个细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

ACL(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总)÷T=3.216×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。

b.96孔板测定的计算公式如下

1、血清(浆)ACL活力计算

单位定义:每毫升血清(浆)每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

ACL(nmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=3216×ΔA

2、组织、细菌或细胞中ACL活力计算

(1)按样本蛋白浓度计算

单位定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1nmol NADH定义为一个酶活力单位。

ACL(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=3216×ΔA÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位定义:每g组织每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

ACL(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总)÷T=3216×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算:

单位定义:每1万个细胞每分钟消耗1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

ACL(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总)÷T=6.432×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。


上海牧荣生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

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  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

ATP-柠檬酸裂解酶(ATP-citrate lyase,ACL)试剂盒

















































































































  • 中文名称:甲泛葡胺

  • 英文名称:Metrizamide


分子式:C18H22I3N3O8

分子量:789.1

  • CAS号:31112-62-6

    级别:Reagent Grade

  • EINECS编号:250-475-5

  • 储存条件:2~8℃

  • 中文别名:甲泛葡胺、阿米派克、甲泛影酰胺、室椎影

  • 英文别名:2-((3-(acetylamino)-5-(acetylmethylamino)-2,4,6-triiodobenzoyl)amino)-2-deox、2-(3-ace***ido-2,4,6-triiodo-5-(n-methylace***ido)benzamido)-2-deoxy-d-gluco

  • 是否危险:否





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甲泛葡胺/甲泛影酰胺/室椎影/阿米派克/造影胺/Metrizamide






































































































































































































































































































































































































































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