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β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)测试盒

简要描述:β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)测试盒: 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品。一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-06
  • 访  问  量:40

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)测试盒


正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义

β-GD广泛存在于动物组织中,是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。该酶在肝细胞中含量较高。此外在胃癌组织中含量丰富,测定胃液β-GD活性对于研究胃癌具有重要的意义。

测定原理

β-GD催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸产生游离的酚酞,通过测定苯酚含量反应该酶活性高低。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体2mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2mL蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂仍-20℃保存;

试剂三:液体15mL×1瓶,4℃保存;

试剂四:1μmol/mL标准储备液10mL,4℃保存;

样品测定的前处理

按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。

2、样本测定

试剂名称(μL)

加样孔

测定管

标准管

空白管

试剂一

20

20

20

试剂二

20

20

20

样本

10



1μmol/mL标准液


10


蒸馏水



10

混匀后,37℃反应30min

试剂三

150

150

150

混匀, 540nm下测定各管吸光值

注意:标准管和空白管只需测一次。

β-GD活性计算

(1)按样本鲜重计算:

单位定义:每小时每g鲜重样品中催化产生 1μmol酚酞的量为一个活力单位。

β-GD(μmol/h/g 鲜重)= (C标准管×V1)×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=2×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W

(2)按样本蛋白浓度计算:

单位定义:每小时每mg组织蛋白催化产生 1μmol酚酞的量为一个活力单位。

β-GD(μmol/h/mg prot)= (C标准管×V1)×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=2×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr

C标准管:标准管浓度, 1μmol/mL;V1:加入样本体积:0.01mL;V2:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,0.5h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。

上海牧荣生物科技有限公司

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β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)测试盒




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