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土壤β木糖苷酶( SβXYS)测试盒

简要描述:土壤β木糖苷酶( SβXYS)测试盒 土壤β-木糖苷酶(Solid-β- xylosidase, S-β-XYS)测定试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

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  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

土壤β木糖苷酶( SβXYS)测试盒 

微量法100T/48S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。

测定原理:

S-β-XYS催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰,测定405nm光吸收增加速率,可计算S-β-XYS活性。

自备实验用品及仪器:

天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体1mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提取:

约0.1g鲜土或风干土样,加入1mL提取液进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g,4℃,离心10min,取上清待测。

测定操作表:

  1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至405nm。

  2. 操作表


对照管

测定管

样本(μL)

40

40

试剂一(μL)


10

试剂二(μL)

80

70

混匀,45℃水浴20min

试剂三(μL)

80

80

混匀,静置5min,405nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

β-木糖苷酶活性计算公式:

  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值ΔA。

酶活定义:每克土样每天催化产生1μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T

=16.33×(ΔA-0.0011)÷W

V样总:加入提取液体积,1mL; V反总:反应总体积,0.12mL;V样:反应中样品体积,0.04mL; W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y=6.613x+0.0011,R2=0.9998;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值ΔA

酶活定义:每克土样每天催化产生1μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T

=32.66×(ΔA-0.0011)÷W

V样总:加入提取液体积,1mL; V反总:反应总体积,0.12mL;V样:反应中样品体积,0.04mL; W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;

 

ΔA控制在0.01-1范围内,若ΔA大于1,可适当减小样本量。

标准曲线线性范围为:0.01μmol/mL-0.5μmol/mL

上海牧荣生物科技有限公司

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土壤β木糖苷酶( SβXYS)测试盒 







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