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土壤中性磷酸酶(SNP)测试盒

简要描述:土壤中性磷酸酶(SNP)测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

土壤中性磷酸酶(SNP)测试盒

微量法 100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

土壤磷酸酶是催化土壤有机磷矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的显著影响,根据最适PH范围,一般把土壤磷酸酶分为中性、酸性和碱性三种类型。

测定原理:

中性环境中,S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,通过测定酚的生成量即可计算出NP活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。

试剂组成和配制:

试剂一:液体×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。用前加100mL蒸馏水充分溶解。

试剂三:液体×1瓶,4℃保存。

试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加576μL无水乙醇(自备),24μL蒸馏水充分溶解。(变褐色后不能再使用)

标准品:液体×1瓶,0.5 μmol/mL酚标准液,4℃保存。

催化反应:

称取风干混匀土壤约0.1g,加入50μL甲苯(自备),轻摇15min;加400μL试剂一并且摇匀后,置于37℃恒温培养箱,开始计时,催化反应24h;到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀,以终止酶催化的反应。8000g,25℃离心10min,取上清液置于冰上待测。

显色反应:

1. 分光光度计预热30 min以上,调节波长到660 nm,蒸馏水调零。

2. 空白管:取微量玻璃比色皿/酶标板,加入10μL蒸馏水,20μL试剂三,4μL试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水166μL,混匀后25℃静置30min,于660nm测定吸光度,记为A空白管。

3. 标准管:取微量玻璃比色皿/酶标板,加入10μL标准液,20μL试剂三,4μL试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水166μL,混匀后25℃静置30 min,于660nm测定吸光度,记为A标准管。

4. 测定管:取微量玻璃比色皿/酶标板,加入10μL上清液,20μL试剂三,4μL试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水166μL,混匀后室温25℃30 min,于660nm测定吸光度,记为A测定管。

注意:空白管和标准管只需测定一次。

S-NP活性计算:

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

活性单位定义:37℃中每克土壤每天释放1nmol酚为1个酶活单位。

S-NP(μmol/d/g 土样)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W÷T

= 0.725×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W

C标准液:0.5μmol/mL;V总:催化体系总体积,1.45mL;W:土壤样品质量,g;T:催化反应时间,24 h=1 d。


上海牧荣生物科技有限公司

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土壤中性磷酸酶(SNP)测试盒








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