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土壤亚硝酸还原酶(SNiR)测试盒

简要描述:土壤亚硝酸还原酶(SNiR)测试盒 土壤亚硝酸还原酶(Solid-Nitrite reductase,S-NiR)试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

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  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

土壤亚硝酸还原酶(SNiR)测试盒 

微量法100T/48S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

土壤亚硝酸还原酶是反硝化作用中的关键酶之一,参与亚硝酸盐至NO的还原反应,它的活性反映了生物降解过程中氮素的转化效率,为氮素转化规律的研究提供一定的依据。

测定原理

亚硝酸还原酶可将NO2—还原为NO,使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的NO2—减少,即540nm处吸光值的变化可反应土壤中亚硝酸还原酶的活性。

自备的仪器和用品

天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、水浴锅、低温离心机。

试剂的组成和配制

试剂一:液体4mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加4mL蒸馏水溶解。

试剂三:液体4mL×1瓶,4℃保存。(如出现沉淀可以70-80℃加热溶解)

试剂四:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。(如出现沉淀可以70-80℃加热溶解)

试剂五:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。

工作液:临用前根据用量将试剂四和试剂五以1:1的比例混合。

样品处理

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

测定操作表


空白管

对照管

测定管

风干土样(g)


0.02

0.02

蒸馏水(μL)


40


试剂一(μL)

40


40

试剂二(μL)

40

40

40

混匀后,25℃反应1h

试剂三(μL)

40

40

40

充分震荡30S,10000rpm,4℃,离心10min

上清液(μL)

70

70

70

工作液(μL)

140

140

140

充分混匀,静置3min后测定540nm处吸光值,分别记为A空白管、A对照管、A测定管。空白管只要做一管,每个测定管需设一个对照管。

计算公式

a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 1.5562x+ 0.0088,R2 = 0.996;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值(A标准管-A空白管)。

酶活单位定义:每g土样每天还原1μmol NO2ˉ 的量为一个酶活力单位。

S-NiR(μmol /d /g土样)=[A空白管-(A测定管-A对照管) -0.0088]÷1.5562×V标÷W÷T

= 0.617×[A空白管-(A测定管-A对照管) -0.0088]÷W

T:反应时间,1h=1/24d;V标:标准液体积,0.04mL;W:样本质量,g。

b. 使用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.7781x+ 0.0088,R2 = 0.996;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值(A标准管-A空白管)。

酶活单位定义:每g土样每天还原1μmol NO2ˉ 的量为一个酶活力单位。

S-NiR(μmol /d /g土样)=[A空白管-(A测定管-A对照管) -0.0088]÷0.7781×V标÷W÷T

= 1.234×[A空白管-(A测定管-A对照管) -0.0088]÷W

T:反应时间,1h=1/24d;V标:标准液体积,0.04mL; W:样本质量,g。

注意事项

  1. 配制好的工作液3天内使用完。

  2. 若吸光值超过1.5,将上清液进行适当的稀释后再加入工作液显色,并在计算公式中乘以稀释倍数。

  3. 严格控制显色时间,否则会对结果有影响。

  4. 标准曲线线性范围为0.03μmol/mL-1.5μmol/mL。

  5. A空白管-(A测定管-A对照管)线性范围为0.02-1.5。


上海牧荣生物科技有限公司

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土壤亚硝酸还原酶(SNiR)测试盒 










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