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土壤外切β1,4葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(SC1)测试盒

简要描述:土壤外切β1,4葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(SC1)测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

土壤外切β1,4葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(SC1)测试盒

微量法 100管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

C1(EC3.2.1.91)存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。

测定原理:

采用3,5-二硝基水杨酸法测定S-C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。

需自备的仪器和用品:

酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体6mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存;

样品测定的准备: 

称取约0.1g新鲜土样或风干土样,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤:

  1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。

2、加样表(在EP管中依次加入下列试剂):

试剂名称(μL)

测定管

对照管

  样本

10

10

试剂一

100


蒸馏水


100

混匀,37℃准确水浴2h

试剂二

200

200

混匀, 90℃水浴10min(盖紧,防止水分散失),冷却后,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中,测540nm下吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。

S-C1活性计算

  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为y = 6.4078x - 0.0673;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

单位的定义:每g土样每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T

=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W

1000:1mg/mL=1000ug/mL;V反总:反应体系总体积,0.11mL; V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,120 min; W:样本质量,g;

 b.96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为y = 3.2039x - 0.0673;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T

=28.61×(ΔA+0.0673) ÷W

1000:1mg/mL=1000ug/mL;V反总:反应体系总体积,0.11mL; V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,120 min; W:样本质量,g。


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土壤外切β1,4葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(SC1)测试盒





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