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土壤植酸酶测试盒

简要描述:土壤植酸酶测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
  • 访  问  量:63

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

土壤植酸酶测试盒

微量法100T/48S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。

测定原理

植酸酶在一定温度和pH值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在700nm处有特征吸收峰,根据700nm处吸光值变化可计算得植酸酶活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、酶标仪、96孔板、恒温水浴锅,甲苯(不允许快递)。

试剂组成和配制

缓冲液:液体60mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂×1瓶,4℃避光保存,临用前加缓冲液30mL配制,现用现配;用不完的试剂4℃保存一个月。

试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。

显色剂:粉剂×6管,4℃避光保存,临用前根据用量每瓶加0.4mL双蒸水溶解,再加1.6mL试剂二混匀

样本处理

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

测定操作表


对照管

测定管

样本(g)

0.03

0.03

甲苯

20

20

振荡混匀,室温放置15min

缓冲液(µL)

500


试剂一(µL)


500

混匀,37℃孵育24h,10000g,4℃离心5min,取上清

上清

100

100

显色剂(µL)

100

100

混匀,静置15min,测定700nm处吸光值,△A=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

酶活性计算公式

标准曲线:y = 0.8795x + 0.0084,R2 = 0.9977;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值△A。

酶活性定义:在37℃,pH5.5的条件下,每克土样每小时从5mmol/L的植酸钠溶液中释放出1μmol的无机磷为一个酶活力单位。

植酸酶活性(μmol/h /g 土样)=(△A-0.0084)÷0.8795×V反总÷W÷T

                             =0.82×(△A-0.0084)

V反总:反应总体积,0.52mL;T:反应时间,24h;W:样本质量,0.03g。

注意事项

1、显色剂需要临用前根据用量配制,每一瓶是10个样本的用量,新配制的显色剂若有颜色则已经污染或者试剂过期,应放弃使用。

2、ΔA线性范围为0.01-0.5。


上海牧荣生物科技有限公司

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土壤植酸酶测试盒




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