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植物花色苷测试盒

简要描述:植物花色苷测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
  • 访  问  量:57

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

植物花色苷测试盒

微量法 100管/96样

正式测定前取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

花色苷是一类易溶于极性溶剂的天然色素,属黄酮类化合物。花色苷广泛存在于植物的根、茎、叶、花和果实中,使其呈现由红到紫等不同颜色,是植物主要的呈色物质。

测定原理:

采用pH示差法测定花色苷含量,当pH为1.0时花色苷在530nm处有最大吸收峰,而当pH为4.5时,花色苷转变为无色查尔酮形式,在530处无吸收峰, 利用此特性分别测定在不同pH下的530nm和700nm处的吸光度值。pH示差法减少了溶液pH和溶剂差异的影响,排除了其他非花色苷类物质对检测结果的干扰。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体100 mL× 1瓶,4℃保存;

试剂一:液体20 mL× 1瓶,4℃保存;

试剂二:液体20 mL × 1瓶,4℃保存;

花色苷的提取: 

按照烘干样品质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g烘干样品,加入1mL提取液),充分匀浆后转移到EP管中,提取液定容至1 mL,盖紧后4℃浸提24 h,8000 g,常温离心10 min,取上清液待测。

测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上;试剂一和试剂二25℃(室温)预热10min以上;

2、取20 µL上清液和180 µL试剂一(相当于稀释10倍),40℃水浴20min,分别测定530nm和700nm处的吸光值,分别记为A1和A2。

  1. 取20 µL上清液和180 µL试剂二(相当于稀释10倍),40℃水浴20min,分别测定530nm和700nm处的吸光值,分别记为A3和A4。

  2. 计算△A=(A1-A2)-(A3-A4)

注意:如果A1大于1,可以适当加大稀释倍数,保证总体积200 µL不变,如10 µL上清液和190 µL试剂一(相当于稀释20倍);如果A1小于0.1,可以适当缩小稀释倍数,保证总体积不变,如100 µL上清液和100 µL试剂一(相当于稀释2倍),使A1保持在0.1~1范围内,可提高检测灵敏度;同样调整上清液和试剂二体积比例;计算时以实际稀释倍数代入下述公式中。

花色苷含量计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

花色苷含量(µg/g干重)=[ΔA×V÷(ε×d)×M×F×106]÷W=16.7×ΔA× F÷W

V:提取液体积,1×10-3L;ε:花色苷的摩尔消光系数,2.69×104 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;M:花色苷的相对分子质量:449.2g/mol;F:稀释倍数;106:1g=106µg;W:样本干重:g。

b.用96孔板测定的计算公式如下

花色苷含量(µg/g干重)=[ΔA×V÷(ε×d)×M×F×106]÷W=33.4×ΔA× F÷W

V:提取液体积,1×10-3L;ε:花色苷的摩尔消光系数,2.69×104 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;M:花色苷的相对分子质量:449.2g/mol;F:稀释倍数;106:1g=106µg;W:样本干重:g。ΔA线性范围为0.005-0.5。



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植物花色苷测试盒


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