您好!欢迎访问上海牧荣生物科技有限公司网站!
咨询热线

17621170138

当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > 海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)测试盒

海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)测试盒

简要描述:海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)测试盒 海藻糖-6-磷酸合成酶(Trehalose-6-phosphate- Synthase ,TPS) 试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
  • 访  问  量:64

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)测试盒


分光光度法 50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

海藻糖是由两个葡萄糖分子以α ,  α- 1- 1  糖苷键连接而成的一种非还原双糖, 广泛存  在于细菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆虫、 无脊椎动物和高等植物等多种有机体 中。海藻糖的非还原性决定了它对酸、碱、高温等的稳定性。另外, 它本身具有很强的吸水 性,使它在生物体内具有抗脱水作用,在逆境条件下可通过识别外界刺激、产生和传递信号、 基因表达和代谢调节来保护植物免受不良环境的伤害。

植物体内主要以葡萄糖为底物合成海藻糖,该反应首先在海藻糖-6-磷酸合成酶

(trehalose-6-phosphate synthase ,TPS)的作用下,催化尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和 6- 磷酸葡萄糖反应生成中间产物6-磷酸海藻糖, 再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶 (trehalose

6-phosphate phosphatase ,TPP)的作用下去磷酸化,生成海藻糖。因此,测定TPS活性对于

研究植物逆境具有重要意义。

测定原理:

TPS 催化 UDPG 与 G6P 生成海藻糖-6-磷酸,同时产生 UDP;UDP 在丙酮酸激酶与乳 酸脱氢酶作用下,氧化 NADH 为 NAD+,NADH 的下降速率与 UDP 含量成正比,通过 340nm 吸光度下降速率反映 TPS 活性。

需自备的仪器和用品:

分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶, 4℃保存;

试剂一:粉剂×1 瓶, -20℃保存; 临用前加入 10mL 试剂五溶解,用不完的试剂分装后-20℃ 保存,禁止反复冻融;

试剂二:粉剂×2 瓶, -20℃保存;临用前每瓶加入 25mL 试剂五溶解;现配现用;

试剂三:粉剂× 1 瓶, -20℃避光保存;临用前加入 0.1mL 试剂五溶解,用不完的试剂分装后 -20℃保存,禁止反复冻融;

试剂四:100μL×1 瓶, 4℃避光保存;临用前低速离心,以防止试剂沾在管壁;

试剂五:液体 100mL× 1 瓶,4℃保存;

工作液的配制: 临用前, 先配置好 1 瓶试剂二和试剂三, 然后在试剂二瓶中加入 25μL 试剂 三和 25μL 试剂四, 充分混匀,现配现用。

样品测定的准备:

1、细菌或细胞的处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量 (104 个): 提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液), 超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3S,间隔 10S,重复 30 次) ;8000g ,4℃离心 10min,取上清, 置冰上待测。

2、组织的处理: 按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液) ,冰浴中匀浆。 8000g  

4℃离心 10min,取上清, 置冰上待测。 测定步骤

1 、在 EP 管中加入如下试剂

试剂名称(μL)

测定管

样本

150

试剂一

150

 

混匀, 30℃反应 20min ,95℃水浴 2min 灭活, 冷却至室温。10000g 4℃离心 5min,取上层 反应液待测。
2、工作液配制: 详见试剂的组成和配制中工作液的配制。
3、在 1mL 玻璃比色皿中加入如下试剂

反应液

100

工作液

900

 

混匀,测定 340nm 下 5min 后吸光值 A1 与 10min 后吸光值 A2 ,ΔA=A1-A2。
TPS 活力计算:
1、按照蛋白浓度计算
单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化 1nmol NADH 定义为一个酶活力单位。
TPS 活力(nmol/min/mg prot)=ΔA×V 反总÷  ( ε×d)×109÷(V 样×Cpr)÷T×3
=643×ΔA ÷Cpr
2、按样本鲜重计算
单位的定义:每 g 组织每分钟催化 1nmol NADH 定义为一个酶活力单位。
TPS 活力(nmol/min/g  鲜重)=ΔA×V 反总÷  ( ε×d)×109÷(W× V 样÷V 样总) ÷T×3
=643×ΔA÷W
3、按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每 1 万个细菌或细胞每分钟催化 1nmol NADH 定义为一个酶活力单位。
TPS 活力(nmol/min/104  cell)=ΔA×V 反总÷  ( ε×d)×109÷(V 样×细胞数量)÷T×3
= 1.28×ΔA
V  反总:反应体系总体积,1mL;ε:NADH 摩尔消光系数, 6.22×103  L / mol /cm;d:比色 皿光径, 1cm;V 样:加入样本体积, 0.15 mL;V 样总:加入提取液体积, 1 mL;T:反应 时间, 5  min;3,稀释倍数;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量;细胞数量, 500 万。


上海牧荣生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)测试盒


产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
扫一扫,关注微信
地址:上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 传真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧荣生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2022017655号-1