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通用型 ECL 显色试剂盒

简要描述:通用型 ECL 显色试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-09
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

通用型 ECL 显色试剂盒


增强型 ECL 化学发光检测试剂盒用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶(HRP)的抗体及其关联的抗原。其原理是,蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上,以一抗及 HRP 标记的二抗结合膜上的目的蛋白,或以HRP 标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后用本产品配制的 ECL 工作液,室温孵育膜数分钟,将印迹膜用保鲜膜包被粘贴固定于 X 光片曝光暗盒。然后转入暗室将 X 光胶片压在膜上曝光数秒到数小时,显影定影后蛋白质或核酸条带可清晰显示在 X 光胶片上。

产品组分

A 液

B 液

运输与保存方法

常温运输。频繁使用可置于室温保存,一年稳定;长期不用,建议置于 4 ºC 保存延长效期。【注】:A 液需避光保存!

操作方法(以 X 光胶片为例)

 1. 执行常规电泳、转膜、HRP 标记抗体或者 HRP 标记核酸探针孵育、洗膜。【注】:ECL 发光液是 HRP 的显色底物,因此检测系统最终必须基于 HRP 酶标记抗体或者核酸探针。 

2. 最后 1 次洗膜的同时,新鲜配制发光工作液(推荐 100-200 μL 发光液/cm2 膜):分别取等体积的 A 液和B 液,混匀备用。【注】:取 A 液和 B 液一定要用不同的枪头;另建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。 

3. 用平头镊取出膜,搭在滤纸上沥干洗液,勿使膜全干燥。用移液器将工作液加到膜上,使之充分接触。室温孵育 1-2 min,准备立即压片曝光。4. 用平头镊子夹起膜,膜的下缘轻轻接触吸水纸,去除膜上多余液体,留下少量工作液,不可让膜全干燥。 

5. 在 X 光胶片暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将印迹膜贴在保鲜膜上,将保鲜膜折起来全包裹印迹膜,去除气泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖印迹膜的保鲜膜固定在暗盒内,蛋白带面向上。

 6. 暗房内取一张 X 光胶片至于包裹的膜上,压片,曝光 30 sec-2 min,显影定影冲洗。【注】:曝光时间需根据曝光强度做相应的调整。若是背景过高,可使用两张 X 光胶片同时压片。 

曝光方法 

使用 CCD 拍照:可以将膜放置于工作液中,开机后按照使用说明,将膜取出,进行拍照。另外,也可以根据情况,调整机器测量参数,提高信噪比。 

注意事项 

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

2)转膜、封闭、孵育都需要避免气泡,另外戴手套可以避免在膜上留下手印,保持膜的干净。 

3)长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。 

4)某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜

5)避免将多张膜置于同一个洗膜盒内洗膜,相互吸附或摩擦可能造成很深的背景。 

6)使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。 

7)使用生物素-亲和素系统,避免使用牛奶封闭,可能会导致背景过高。 

8)金属氧化物颗粒可能会造成膜上出现颗粒状斑点,避免使用带有锈迹的剪刀以及镊子,建议使用塑料的平头镊子。

 9)叠氮*钠(NaN3)能抑制 HRP 活性,若回收 HRP 标记探针或者抗体应避免使用 NaN3,如必需使用勿超过 0.01%。 

10)本品无特殊毒性,按普通化学品处理。11) 本产品仅作科研用途!


问题与解决方案

通用型 ECL 显色试剂盒

上海牧荣生物科技有限公司

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通用型 ECL 显色试剂盒

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