LipoD293™ In Vitro DNA Transfection Reagent

LipoD293™ In Vitro DNA Transfection Reagent  产品型号：SL100668

通过利用我们创新的特色脂质结合技术，LipoD293(Ver. II)是通过添加用于转染HEK293细胞和其他哺乳动物细胞的有增强子而专门设计和配制的(图1)。作为第二代基于脂质体的DNA转染试剂，lipod 293(Ver II)为HEK293相关细胞以及许多细胞毒性较低的哺乳动物细胞提供高效率。LipoD293试剂(Ver. II)从其先前版本升级而来，具有精细的化学性质，在基因递送方面的效率提高了3~4倍。LipoD293试剂(Ver. II)，1.0 ml，足以在24孔板中进行约666次转染或在6孔板中进行约333次转染。


图一。一幅展示LipoD293(版本。II)增强的基因递送

特征
-难以转染细胞的选择
-病毒产量高
-同样适用于很长的DNA(高达180 kb)
-同样适用于悬浮293细胞(如293F、293H等)
-高水平的重组蛋白生产
-血清和抗生素的存在提高了293细胞的效率
-单DNA转染和多DNA共转染的高效率
-非常实惠

储存条件
储存在4°c。如果储存得当，该产品可稳定储存12个月或更长时间。

lipod 293 DNA体外转染试剂(Ver。II)品牌产品

LipoD293试剂转染效率的比较(版本II)对HepG2细胞的lipofectamine 2000 (L2K)和Fugene HD。
右图:LipoD293转染效率的比较(版本。II)用Lipofecatmine 2000 (L2K)和Fugene HD对HepG2细胞进行处理。GFP DNA (pEGFP-N3)按照生产商的方案用不同的转染试剂转染HepG2细胞(在胶原蛋白预处理的培养皿上培养)。转染后48小时通过流式细胞仪检测GFP阳性细胞(%)和荧光强度
左图:血清和抗生素的存在增强了LipoD293(版本。II)对HepG2细胞的效率。用三种不同的条件转染HepG2细胞(在胶原蛋白处理的培养皿上生长)——不含血清和抗生素，存在10%血清和抗生素，转染后5小时去除，存在10%血清和抗生素，转染后5小时不去除。


LipoD293试剂转染效率的比较(版本II)对CHO细胞的lipofectamine 2000 (L2K)、TransIT和Fugene 6。
右侧面板:比较LipoD293的转染效率(Ver。II)用Lipofecatmine 2000 (L2K)、TransIT和Fugene 6对CHO细胞进行处理。编码海肾萤光素酶(phRL-CMV)和GFP (pEGFP-N3)的DNA用不同的DNA转染试剂按照制造商的方案转染。转染后24小时，分别用海肾检测系统和Nikon Eclipse荧光显微镜检测海肾荧光素酶活性和GFP荧光。
左侧面板:LipoD293与Lipofecatmine 2000 (L2K)、TransIT和Fugene 6的价格(美元/1.0毫升小瓶)比较。所有的价格都是从制造商的网站上收集的。


LipoD293试剂与lipofectamine 2000 (L2K)对难以转染的细胞(原代大鼠主动脉平滑肌细胞)的转染效率的比较。按照制造商的方案，分别通过LipoD293试剂(左图)和Lipofecatmine 2000 (L2K，右图)制备大鼠主动脉平滑肌细胞并用pEGFP-N3转染。转染效率通过在转染后24小时用Nikon Eclipse 2000显微镜检测GFP荧光来评估。以上图片由芝加哥大学肺部和重症监护科的尼古拉·杜林博士提供。


LipoD293试剂与Fugene HD对难以转染细胞LNCap细胞的转染效率的比较。LNCap细胞按照ATCC推荐的程序生长，并按照制造商的方案分别用每孔(6孔板)pBabe-hygro-SSeCKs (1.5ug)和peg FP-N3(0.5 ug)lipod 293试剂(左图)和Fugene HD(右图)共转染。转染效率通过在转染后24小时用Nikon Eclipse 2000显微镜检测GFP荧光来评估。以上图片由罗斯威尔公园癌症研究所的Lyn Gao博士提供。


两个实例显示了LipoD293试剂对难以转染的细胞(如HepG2和SaoS-2细胞)的功效。95%融合的HepG2和SaoS-2细胞用pEGFP-N3和pSV-？-半乳糖苷酶DNA，分别存在于血清/抗生素中。转染后48小时，通过Zeiss 510共聚焦显微镜和？-半乳糖苷酶染色试剂盒。



LipoD293试剂与293转染素对HEK293细胞转染效率的比较。使用LipoD293体外DNA转染试剂(Ver)用pEGFP-C1质粒转染的HEK293细胞。II)(上图)和Invitrogen受欢迎的品牌产品293fectin(下图)。转染后24小时，通过Nikon Eclipse荧光显微镜用DIC相位成像(左图)和FITC成像(右图)观察细胞。


LipoD293试剂与293fectin、Xfect和Fugene 6转染试剂对悬浮293F细胞蛋白质生产的比较。30毫升使用LipoD293体外DNA转染试剂(Ver)用pEGFP-6xHis质粒转染在标准培养基中培养的293F细胞。II) (20微克质粒DNA)、293转染素(30微克质粒DNA)、x转染素(30微克质粒DNA)和Fugene 6 (30微克质粒DNA)。转染后48小时观察GFP荧光(左图), A代表LipoD293，B代表293转染素，C代表x转染素，D代表Fugene 6。然后纯化6xHis标记的GFP蛋白一个尼-NTA阿芬尼特y列。在SDS-PAGE上解析5 ul第一洗脱级分，随后进行考马斯亮蓝染色(右上图E ),泳道1用于LipoD293，泳道2用于蛋白质标记，泳道3用于Xfect，泳道4用于293fectin，泳道5用于Fugene 6。蛋白质产量通过分光计定量(右下图F)。



LipoD293(版本II)和脂质体LTX (LTX)对慢病毒(LV)产生的影响。用lipod 293(Ver。II)和Lipofectamine LTX (LTX)导入293英尺细胞。GFP载体pHR-SIN-cppt-CMVEWP用于测定LV的滴度。将每孔1×105个293F细胞铺在24孔板中，然后加入不同量的载体上清液，分别为1微升(上图)和10微升(下图)。5天后，用FACS传代细胞。右上角的数字表示转导细胞的百分比。用LipoD293和L2K产生的左心室的滴度分别被定量为8x10^6和3x10^6 tu/ml

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