intactgenomics：PEmax Enzyme

描述

PE pegRNA Synthesis Kit也可以供应

聚集的规则间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR关联（Cas）系统通过CRISPR RNA（crRNA）引导沉默入侵核酸，为细菌和古菌提供对病毒和质粒的适应性免疫^1。CRISPR系统由一个短的非编码引导RNA（sgRNA）组成，该RNA由一个靶互补CRISPR RNA（crRNA）和一个辅助转激活crRNA（tracrRNA^）2组成。Prime编辑作为一种精准基因编辑技术越来越受欢迎。主编辑酶是Cas9尼卡酶突变体（H840A）与改良小鼠白血病病毒逆转录酶（MMLV-RT）的融合。其中一种优化的引级编辑融合称为PEmax酶^3-4。这种引发编辑酶使得精确的基因编辑成为可能，无需双链DNA断裂（DSBs）或供体DNA模板。PEmax需要一种独特的长gRNA，称为“pegRNA"，如图1所示的示意图。

完整基因组学（IG）^® PEmax酶是纯化的重组化磷酸链球菌Cas9尼卡酶突变体（H840A）-小鼠莫洛尼白血病病毒逆转录酶（MMLV-RT）融合蛋白^3-4，含有C端核定位信号（NLS），用于靶向细胞核。该酶设计用于执行CRISPR引发编辑^3-4。该酶的物理纯度为≥85%，由SDS-PAGE通过Coomassie®蓝染色评估。

产品来源
：大肠杆菌BL21（DE3）菌株表达化脓性链球菌的重组PEmax基因，并配有定制的蛋白质纯化标签。

组件与存储
PEmax酶套装包含以下物品。所有成分存放在-20°C。

• PEmax酶

• 5个PEmax贴角缓冲器：20 mM HEPES，100 mM NaCl，5 mM MgCl_2,0.1 mM EDTA，pH 6.5 @ 25 °C

质量控制检测
PEmax酶不含可检测RNase、内切酶（撕裂）及非特异性DNase活性。

功能测试
我们已证明，PEmax在体外转录合成的pegRNA引导分子存在下具有特异性切口活性（见图2），体外RT活性（未显示）。

酶稀释/储存缓冲液（可选）：50 mM 三盐酸钠，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% 甘油，pH 7.5 @ 25 ºC

上海牧荣生物科技有限公司

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