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当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > K61003MagVigen™ – Plasma DNA Capture

MagVigen™ – Plasma DNA Capture

简要描述:MagVigen™ 血浆 DNA 捕获试剂盒 (K61003) 能够从血浆和血清中捕获小的循环游离 DNA (>30bp)。MagVigen™ – Plasma DNA Capture

  • 产品型号:K61003
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2023-12-18
  • 访  问  量:434

详细介绍

品牌其他品牌供货周期一个月
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,制药

MagVigen™ – Plasma DNA Capture

产品内容

  • MagVigen™ 血浆 DNA 捕获纳米颗粒

  • 裂解缓冲液

  • 蛋白酶K

  • 蛋白酶 K 缓冲液

  • 洗涤缓冲液 1 库存

  • 洗脱缓冲液

所需材料

  • 异丙醇

  • 乙醇

  • 十二烷基硫酸钠,20%

  • 磁性架(NVIGEN Cat# A20006)

MagVigen™ 血浆 DNA 捕获试剂盒 (K61003) 能够从血浆和血清中捕获小的循环游离 DNA (>30bp)。

Protocols

  1. 准备血浆样品:如果使用冷冻血浆,请在室温下解冻。将血浆以 12000x g 离心 5 分钟,以去除任何血液和细胞碎片。


  2. 制备裂解缓冲液:如果有固体,则在 60°C 下加热几分钟以制成澄清溶液。


  3. 制备蛋白酶溶液:将蛋白酶 K 缓冲液添加到蛋白酶 K 粉末瓶中。涡旋混合均匀。储存于-20°C。


  4. 制备洗涤缓冲液 1:根据表 1 计算所需量。向每 550 ul 洗涤缓冲液 1 原液中添加 450 ul 异丙醇。每次都新鲜制作缓冲液。


  5. 检查表1的总体积来决定使用的离心管类型(1.5ml、2ml、5ml、15ml或50ml)。


  6. 将蛋白酶 K 溶液添加到样品管底部,将血浆添加到管中。涡旋 5 秒以充分混合,短暂离心。


  7. 将 20% SDS 添加到管中。涡旋 5 秒以充分混合,短暂离心。


  8. 将裂解缓冲液添加到管中。涡旋 1 分钟以充分混合。短暂地旋转下来。 60°C 孵育 30 分钟。


  9. 添加 MagVigen™ 血浆 DNA 捕获纳米颗粒。轻轻摇动小瓶使其分散。然后加入异丙醇,涡旋混匀,短暂离心,继续涡旋 45 分钟。


  10. 将反应管放在磁力架上沉淀珠子,直至溶液澄清(10-20 分钟,具体取决于磁铁的强度和样品体积)。


  11. 慢慢除去上清液。小心不要带走任何珠子,尽可能多地除去溶液。将磁力架敲击固体表面,使残留溶液沉降到管底,除去所有上清液。


  12. 将管从磁铁上取下,添加洗涤缓冲液 1。通过移液或涡旋混合。如果从较大的 15 或 50 ml 试管开始,请将溶液转移到 1.5 或 2 ml 试管中。短暂地旋转下来。将珠子放在磁力架上沉淀(约 10 分钟),除去上清液。将磁力架敲击表面。除去所有上清液。


  13. 使用 75% 乙醇清洗珠粒。不需要全分散珠粒。管子可以通过磁力架保持在适当的位置。稍微向前和向后倾斜装有样品管的磁力架。然后短暂旋转,使盖子中没有溶液残留。将珠子放在磁力架上(约 3 分钟)并除去所有上清液。在固体表面上敲击磁力架,使上清液残留物沉降到管底部。除去所有上清液。


  14. 使用 75% 乙醇再次清洗珠粒。将珠子沉淀(约 2-3 分钟)并除去所有上清液。


  15. 将管子放在磁力架上,风干沉淀以蒸发所有乙醇。这需要 2-3 分钟。


  16. 将所需量的洗脱缓冲液添加到珠子中,上下移液直至所有沉淀物全重新分散。将珠子分散在洗脱缓冲液中 3 分钟。


  17. 短暂地旋转下来。然后将管子放在磁力架上 2-3 分钟。


  18. 收集上清液,不要干扰磁珠沉淀。上清液含有提取的DNA。吸取 DNA 溶液进行下游实验时,将管子放在磁铁旁边。提取的 cfDNA 溶液如果不立即使用,可保存在 -20°C。

MagVigen™ – Plasma DNA Capture

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