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3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenas

简要描述:3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-04-26
  • 访  问  量:70

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)试剂盒


GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途径的关键酶,与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关,在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。

测定原理

3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD,340nm处测定NADH的减少量可反映GADPH活性的高低。

需自备的仪器和用品

分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制

提取液一:液体100mL×1瓶,4℃保存。

提取液二:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;

试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体14uL×1支,4℃保存;

组织样本的前处理

①总GAPDH提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。

②胞浆和叶绿体GAPDH酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆GAPDH酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中GAPDH酶活性。

建议测定总GAPDH酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的GAPDH,则按照步骤②提取粗酶液。

细菌或培养细胞的前处理

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤

  1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

  2. 样本测定

(1)工作液的配制:将试剂二全部倒入试剂一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

(2)在试剂三中加入500μL蒸馏水,充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

(3)在微量石英比色皿或96孔板中加入5μL样本、5μL试剂三和190μL工作液,混匀,加入最后一个试剂的同时开始计时,记录340nm处20s时的吸光值A1和 5min20s后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。

GAPDH活性计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

(1)按样本蛋白浓度计算

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

GAPDH(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=1286×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算

单位的定义:每一万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

GAPDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500 ×V样÷V样总) ÷T=2.572×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.005 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。

b.96孔板测定的计算公式如下

(1)按样本蛋白浓度计算

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=2572×ΔA÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位的定义:每g组织每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

GAPDH(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=2572×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算

单位的定义:每一万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

GAPDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500 ×V样÷V样总) ÷T=5.144×ΔA

V反总:反应体系总体积,2×10-4 L;ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.005 mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。


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  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)试剂盒

















































































































  • 中文名称:甲泛葡胺

  • 英文名称:Metrizamide


分子式:C18H22I3N3O8

分子量:789.1

  • CAS号:31112-62-6

    级别:Reagent Grade

  • EINECS编号:250-475-5

  • 储存条件:2~8℃

  • 中文别名:甲泛葡胺、阿米派克、甲泛影酰胺、室椎影

  • 英文别名:2-((3-(acetylamino)-5-(acetylmethylamino)-2,4,6-triiodobenzoyl)amino)-2-deox、2-(3-ace***ido-2,4,6-triiodo-5-(n-methylace***ido)benzamido)-2-deoxy-d-gluco

  • 是否危险:否





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甲泛葡胺/甲泛影酰胺/室椎影/阿米派克/造影胺/Metrizamide







































































































































































































































































































































































































































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