您好!欢迎访问上海牧荣生物科技有限公司网站!
咨询热线

17621170138

当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > 乙酰胆碱酯酶(AchE)测试盒

乙酰胆碱酯酶(AchE)测试盒

简要描述:乙酰胆碱酯酶(AchE)测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-06
  • 访  问  量:210

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

乙酰胆碱酯酶(AchE)测试盒

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

AchE属于丝氨酸水解酶,广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE催化乙酰胆碱(Ach)水解,在神经传导调节中起重要作用。

测定原理:

AchE催化Ach水解生成胆碱,胆碱与二硫对硝基苯甲酸(DTNB)作用生成5-巯基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm处有吸收峰,通过测定412 nm吸光度增加速率,计算AchE活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1支,4℃保存。临用前加入1.3 mL试剂二,充分震荡溶解。

试剂四:粉剂×1支,4℃保存。临用前加入1.3 mL试剂二,充分震荡溶解。

粗酶液提取:

组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心10min,取上清液待测。

细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

血清等液体:直接测定。

测定操作:

  1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到412 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂二置于37℃水浴中预热30min。

3. 取微量石英比色皿/96孔板,依次加入20μL上清液、160 μL试剂二、10μL试剂三和10μL试剂四,迅速混匀,于412nm处测定3min内吸光值变化,第10s吸光值记为A1,第190s吸光值记为A2。△A测定管=A2-A1。

AchE活性计算:

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

组织AchE活性

(1)按照蛋白浓度计算

活性单位定义:每毫克蛋白每分钟催化产生1nmol TNB的酶量为1个酶活单位。

AchE酶活(nmol/min/mg prot)= (△A÷ε÷d×V反总×109)÷(Cpr ×V样)÷T

= 245×△A÷Cpr

(2)按照样本质量计算

活性单位定义:每克组织每分钟催化产生1nmol TNB的酶量为1个酶活单位。

AchE酶活(nmol/min/g 鲜重)= (△A÷ε÷d×V反总×109)÷(W ×V样÷V样总)÷T

= 245×△A÷W

细菌、细胞AchE活性

活性单位定义:每104个细胞每分钟催化产生1nmol TNB的酶量为1个酶活单位。

AchE酶活(nmol/min/104 cell)= (△A÷ε÷d×V反总×109)÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

= 245×△A÷细胞数量

血清AchE活性

活性单位定义:每毫升血清每分钟催化产生1nmol TNB的酶量为1个酶活单位。

AchE酶活(nmol/min /mL)= (△A÷ε÷d×V反总×109)÷V样÷T

=245×△A

ε:TNB摩尔消光系数,13.6×103 L/mol/cm;d:比色皿光径,1 cm;V反总:反应体系总体积(L),200μL=2×10-4L;V样总:提取液体积,1 mL;106:1mol=1×106μmol;Cpr:蛋白浓度(mg/mL);V样:加入上清液体积(mL),0.02 mL;W :样品质量;T:反应时间(min),3 min。

b.使用96孔板测定的计算公式如下

  1. 组织AchE活性

(1)按照蛋白浓度计算

活性单位定义:每毫克蛋白每分钟催化产生1nmol TNB的酶量为1个酶活单位。

AchE酶活(nmol/min/mg prot)= (△A÷ε÷d×V反总×109)÷(Cpr ×V样)÷T

= 490×△A÷Cpr

(2)按照样本质量计算

活性单位定义:每克组织每分钟催化产生1nmol TNB的酶量为1个酶活单位。

AchE酶活(nmol/min/g 鲜重)= (△A÷ε÷d×V反总×109)÷(W ×V样÷V样总)÷T

= 490×△A÷W

  1. 细菌、细胞AchE活性

活性单位定义:每104个细胞每分钟催化产生1nmol TNB的酶量为1个酶活单位。

AchE酶活(nmol/min/104 cell)= (△A÷ε÷d×V反总×109)÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

= 490×△A÷细胞数量

  1. 血清AchE活性

活性单位定义:每毫升血清每分钟催化产生1nmol TNB的酶量为1个酶活单位。

AchE酶活(nmol/min /mL)= (△A÷ε÷d×V反总×109)÷V样÷T

=490×△A

ε:TNB摩尔消光系数,13.6×103 L/mol/cm;d:96孔板光径,0.5 cm;V反总:反应体系总体积(L),200μL=2×10-4L;V样总:提取液体积,1 mL;106:1mol=1×106μmol;Cpr:蛋白浓度(mg/mL);V样:加入上清液体积(mL),0.02 mL;W :样品质量;T:反应时间(min),3 min。



上海牧荣生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

乙酰胆碱酯酶(AchE)测试盒






产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
扫一扫,关注微信
地址:上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 传真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧荣生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2022017655号-1