您好!欢迎访问上海牧荣生物科技有限公司网站!
咨询热线

17621170138

当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > 几丁质酶测试盒

几丁质酶测试盒

简要描述:几丁质酶测试盒 几丁质酶(Chitinase)试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-06
  • 访  问  量:73

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

几丁质酶测试盒 

微量法100T/48S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁中。而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点。

测定原理:

几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,进一步与对二甲氨基苯甲醛产生红色化合物,在585nm处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。

自备实验用品及仪器

天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(土壤样品专用)和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体105mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存。(若出现结晶,可80℃左右加热溶解后使用)

试剂三:液体5mL×1瓶,4℃保存。

试剂四:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。

粗酶液提取:

  1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心20min,取上清,置冰上待测。

  2. 真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心20min,取上清置于冰上待测。

  3. 培养液:直接测定。

测定操作表:


对照管

测定管

粗酶液(µL)

80

80

提取液(µL)

120

40

试剂一(µL)


80

混匀,37℃水浴1h

试剂二(µL)

40

40

混匀,沸水浴7min,5000rpm,4℃,离心10min,取上清200µL。

试剂三(µL)

40

40

试剂四(µL)

80

80

混匀,37℃,15min,于微量石英比色皿/96孔板,测定A585,ΔA=A测定-A对照。

计算公式:

  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y=0.3088-0.003,R2=0.9995

计算公式:

按照样本重量计算

酶活性定义:37℃条件下,每克组织每小时分解几丁质产生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。

几丁质酶活性(mg/h/g鲜重)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反总÷(V样÷V样总×W) ÷T

=8.096×(ΔA +0.003)÷W

按照蛋白质浓度计算

酶活定义:37℃条件下,每毫克蛋白每小时分解几丁质产生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活单位。

几丁质酶活性(mg/h mg prot)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反总÷(V样×Cpr) ÷T           

= 8.096×(ΔA +0.003)÷Cpr

按细胞数量计算

酶活定义:37℃条件下,每104个细胞每小时分解几丁质产生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活单位。

几丁质酶活性(mg/h /104 cell)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)

=8.096×(ΔA +0.003)÷细胞数量

4、按液体体积计算

酶活定义:37℃条件下,每毫升培养液每小时分解几丁质产生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活单位。

几丁质酶活性(mg/h /mL)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反总÷V样=8.096×(ΔA +0.003)

V反总:反应体系总体积,1mL;V样:反应体系中样本体积,0.4mL;V样总:加入提取液体积,1mL;W:样本质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL

  1. 用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y=0.1544x-0.003,R2=0.9995

计算公式:

按照样本重量计算

酶活性定义:37℃条件下,每克组织每小时分解几丁质产生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。

几丁质酶活性(mg/h/g鲜重)=(ΔA+0.003)÷0.1544×V反总÷(V样÷V样总×W) ÷T

=16.192×(ΔA +0.003)÷W

按照蛋白质浓度计算

酶活定义:37℃条件下,每毫克蛋白每小时分解几丁质产生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活单位。

几丁质酶活性(mg/h mg prot)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反总÷(V样×Cpr) ÷T           

= 16.192×(ΔA +0.003)÷Cpr

按细胞数量计算

酶活定义:37℃条件下,每104个细胞每小时分解几丁质产生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活单位。

几丁质酶活性(mg/h /104 cell)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)

=16.192×(ΔA +0.003)÷细胞数量

4、按液体体积计算

酶活定义:37℃条件下,每毫升培养液每小时分解几丁质产生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活单位。

几丁质酶活性(mg/h /mL)=(ΔA+0.003)÷0.3088×V反总÷V样=16.192×(ΔA +0.003)

V反总:反应体系总体积,1mL;V样:反应体系中样本体积,0.4mL;V样总:加入提取液体积,1mL;W:样本质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL

注意事项:

  1. 反应结束后立即进行比色。

  2. 试剂四有一定的毒性,请操作时做好防护措施。


上海牧荣生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

几丁质酶测试盒 




产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
扫一扫,关注微信
地址:上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 传真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧荣生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2022017655号-1