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土壤碱性木聚糖酶测试盒

简要描述:土壤碱性木聚糖酶测试盒(比色法)/土壤碱性半纤维素酶测试盒(比色法)土壤碱性木聚糖酶(Soil Basic Xylanase,S-BAX)测定试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

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  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
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详细介绍

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应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

土壤碱性木聚糖酶测试盒

微量法100T/48S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,BAX一般分离自最适生长pH为9 -11的微生物。

测定原理:

BAX在碱性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,在沸水浴条件下进一步与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在540nm处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在540nm吸光值增加速率,可计算BAX活力。

自备实验用品及仪器:

天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。

试剂组成和配制:

缓冲液:液体10mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体3mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。

样品处理

新鲜土样风干,过30-50目筛。

测定操作表:

  1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至540nm。

  2. 操作表


对照管

测定管

土样(g)

0.02

0.02

缓冲液(μL)

150

100

试剂一(μL)


50

混匀,50℃震荡反应30min,立即90℃水浴10min,8000g,25℃离心10min,取上清100μL

试剂二(μL)

100

100

混匀,90℃水浴中显色5min,取180μL于微量石英比色皿/96孔板测定540nm处吸光值A,分别记为A对照管、A测定管,△A=A测定管-A对照管。

S-BAX计算公式:

  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 2.8432x - 0.0293,R2 = 0.9985

酶活定义:50℃,pH9.0条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。

S-BAX活力(μmol/d /g 土样)=(△A+0.0293)÷ 2.8432×V反总×103÷ W÷T÷ 150

                         = 16.88×(A540+0.0058)÷ W

V反总:反应总体积,0.15mL;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 1.4216x - 0.0293,R2 = 0.9985

酶活定义:50℃,pH9.0条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。

S-BAX活力(μmol/d /g土样)=(△A+0.0293)÷ 1.4216×V反总×103÷ W÷T÷ 150

                          = 33.76×(A540+0.0058)÷ W

V反总:反应总体积,0.15mL;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。

注意事项:

1. 保证震荡反应30min,使酶与底物充分接触。

2. 注意90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。


上海牧荣生物科技有限公司

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土壤碱性木聚糖酶测试盒









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