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尿素氮测试盒

简要描述:尿素氮测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
  • 访  问  量:37

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

尿素氮测试盒

微量法100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物,在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。

测定原理

样本中尿素氮在氯化高铁一磷酸溶液中与二乙酰一肟和硫胺脲共煮,生成一种红色的二嗪化合物,其颜色的深浅与尿素氮含量成正比,采用二乙酰一肟法测定尿素氮含量。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

试剂组成和配制    

试剂一:液体6mL×1瓶,4℃避光保存,

试剂二:液体60mL×1瓶,4℃避光保存。

样品处理

组织:按照质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL蒸馏水)加入蒸馏水,匀浆后于25℃,10000g离心10min,取上清待测。

细胞:按照细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL )为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL蒸馏水),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。

血清或其它液体:直接检测。

测定操作


空白管

测定管

样品(μL)


20

H2O(μL)

20


试剂一(μL)

50

50   

试剂二(mL)

500

500

混匀,沸水浴10min,冷却后,540nm下测定吸光值。△A=A测定-A空白。空白管只要做一管。

尿素氮含量计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为y =2.048x + 0.0229,R2 = 0.9943;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

1、按照血清(浆)或者细胞培养液体积计算

尿素氮含量(mg/mL)= (△A-0.0229)÷2.048=0.4882×(△A-0.0229)

2、按照样本质量计算

尿素氮含量mg/g鲜重)= (△A-0.0229)÷2.048×V样总÷W=0.4882×(△A-0.0229)÷W

3、按照蛋白浓度计算

尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.4882×(△A-0.0229) ÷Cpr

V样总:加入提取液体积,1 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;

 

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为y = 1.024x + 0.0229,R2 = 0.9943; x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

1、按照血清(浆)或者细胞培养液体积计算

尿素氮含量(mg/mL)= (△A-0.0229)÷1.024=0.9766×(△A-0.0229)

2、按照样本质量计算

尿素氮含量(mg/g鲜重)= (△A-0.0229)÷1.024×V样总÷W=0.9766×(△A-0.0229)÷W

3、按照蛋白浓度计算

尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.9776×(△A-0.0229) ÷Cpr

V样总:加入提取液体积,1 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。

上海牧荣生物科技有限公司

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