您好!欢迎访问上海牧荣生物科技有限公司网站!
咨询热线

17621170138

当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > 柠檬酸(CA)含量测试盒

柠檬酸(CA)含量测试盒

简要描述:柠檬酸(CA)含量测试盒 柠檬酸(citric acid, CA)含量测定试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
  • 访  问  量:46

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

柠檬酸(CA)含量测试盒

 微量法100管/96样

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

CA是生物体内常见的有机酸,是重要的食品风味物质。此外,CA是三羧酸循环第一步反应的产物。

测定原理:

酸性条件下,柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+,在545nm处有特征吸收峰;通过测定545nm吸光值的增加,即可计算出样品中柠檬酸含量。

自备仪器和用品:

低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

试剂组成和配置:

试剂一:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体×1管,-20℃保存。

试剂四:粉剂×1管,室温保存。临用前配制,加入2mL试剂一,充分溶解。

试剂五:液体×1管,4℃避光保存。

标准品:液体×1管,250μmol/L柠檬酸标准液,4℃保存。

样品中柠檬酸提取:

  1. 液体样品中柠檬酸提取:取0.1mL液体加试剂一0.9mL,充分混匀,11000g, 4℃离心10min,取上清液,待测。

  2. 组织中柠檬酸提取:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。11000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

  3. 线粒体中柠檬酸提取:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,600g/min,4℃离心5min;取上清至另一EP管中,11000g,4℃离心10min,弃上清(此上清液可用于细胞质CA含量测定);向沉淀中加试剂二200μl,以及试剂三2μl,充分悬浮溶解,11000g,4℃离心10min,取上清液,待测。

  4. 细菌、真菌中:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);11000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

测定操作:

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到545 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂一置于30℃水浴中预热30min。

3. 空白管:取0.5 mL EP管,依次加入20μL蒸馏水,140μL试剂一,20μL试剂四,20μL试剂五,混匀后室温静置30min,于545nm测定吸光度,记为A空白管。

4. 标准管:取0.5 mL EP管,依次加入20μL标准液,140μL试剂一,20μL试剂四,20μL试剂五,混匀后室温静置30min,于545nm测定吸光度,记为A标准管。

5. 测定管:取0.5 mL EP管,依次加入20μL上清液,140μL试剂一,20μL试剂四,20μL试剂五,充分混匀后室温静置30min,于545nm测定吸光度,记为A测定管。

注意:空白管和标准管只需测定一次。

计算公式:

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

按液体样品的体积计算

柠檬酸含量(nmol/L)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×样品稀释倍数×V总

= 2500×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)

C标准液:250μmol/L=0.25 m mol/L;样品稀释倍数:(0.1 mL样品+0.9mL试剂一)÷ 0.1 mL样品=10;V总:1mL。

按组织质量计算

柠檬酸含量(nmol/g 鲜重)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W

= 250×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管) ÷W

C标准液:250 μ mol/L;V总:上清液总体积,1.0 mL=0.001 L;W:样品质量,g。

按蛋白含量计算

柠檬酸含量(nmol/mg prot)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]÷Cpr

= 250×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管) ÷Cpr

C标准液:250 μ mol/L=0.25μ mol/mL;Cpr:上清液蛋白质含量,mg/mL。

按细胞数量计算

柠檬酸含量(nmol/104 cell)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷细胞数量

= 250×(A测定管-A空白管) ÷(A标准管-A空白管) ÷细胞数量

C标准液:250 μ mol/L;V总:上清液总体积,1.0 mL=0.001 L;

 

b.使用96孔板测定的计算公式如下

按液体样品的体积计算

柠檬酸含量(nmol/L)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×样品稀释倍数×V总

= 2500×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)

C标准液:250μmol/L=0.25 m mol/L;样品稀释倍数:(0.1 mL样品+0.9mL试剂一)÷ 0.1 mL样品=10;V总:1mL。

按组织质量计算

柠檬酸含量(nmol/g 鲜重)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W

= 250×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管) ÷W

C标准液:250 μ mol/L;V总:上清液总体积,1.0 mL=0.001 L;W:样品质量,g。

按蛋白含量计算

柠檬酸含量(nmol/mg prot)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]÷Cpr

= 250×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管) ÷Cpr

C标准液:250 μ mol/L=0.25μ mol/mL;Cpr:上清液蛋白质含量,mg/mL。

按细胞数量计算

柠檬酸含量(nmol/104 cell)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷细胞数量

= 250×(A测定管-A空白管) ÷(A标准管-A空白管) ÷细胞数量

C标准液:250 μ mol/L;V总:上清液总体积,1.0 mL=0.001 L;

注意事项:

1. 样品处理等过程均需要在冰上进行。

2. 试剂四需现配现用,配置好的一周内使用完;

3. 试剂五为易致癌物质,实验过程中,需佩戴手套,避免试剂五溅到皮肤上。

4. 柠檬酸提取液不能用于蛋白含量测定,如需测定蛋白含量,需另取组织,使用本公司BCA试剂盒进行测定。


上海牧荣生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

柠檬酸(CA)含量测试盒




产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
扫一扫,关注微信
地址:上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 传真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧荣生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2022017655号-1