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考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒

简要描述:考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-08
  • 访  问  量:51

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒

微量法 100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

测定原理:

在酸性溶液中,考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合形成蓝色复合物;该复合物在620nm处有最大吸收峰, 其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高,适合微量蛋白质分析。

自备仪器和用品:

离心机、酶标仪、96孔板、移液器和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体11 mL×1瓶,4℃保存。

样品中可溶性蛋白质提取:

  1. 液体样品:澄清液体样品可以直接测定。

  2. 组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:20的比例(建议称取约0.05 g组织,加入1mL提取液(自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水))

冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清,即待测液。(动物样品常常需要稀释)

  1. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

测定操作:

  1. 酶标仪预热30 min。

  2. 在96孔板中加入:

试剂(μL)

测定管

空白管

样本

100


蒸馏水


100

试剂一

100

100

混匀后,测定波长620 nm吸光值,△A=A测定-A空白。

注意:空白管只需要测定一次。

计算公式:

标准曲线:y = 7.1265x - 0.0007  R2 = 0.9997    x: 蛋白标准品浓度(mg/mL)

                                                 y: 吸光值差值

1.按液体样本体积计算:

Cpr(mg/mL)=(△A+0.0007)÷7.1265

                                 =0.1403×(△A+0.0007)

2.按组织样本质量计算:

                    Cpr(mg/g)=(△A+0.0007)÷7.1265×V总÷W            

=0.1403×(△A+0.0007)÷W

V总:提取液体积,1 mL; W:样本质量,g。


上海牧荣生物科技有限公司

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考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒



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