您好!欢迎访问上海牧荣生物科技有限公司网站!
咨询热线

17621170138

当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > 谷胱甘肽S转移酶(GST)测试盒

谷胱甘肽S转移酶(GST)测试盒

简要描述:谷胱甘肽S转移酶(GST)测试盒 谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-08
  • 访  问  量:40

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

谷胱甘肽S转移酶(GST)测试盒

微量法 100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

GST是一种具有多种生理功能的蛋白质家族,主要存在于细胞质内。GST是体内解毒酶系统的重要组成部分,主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH的巯基共价结合,使亲电化合物变为亲水物质,易于从胆汁或尿液中排泄,达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。因此,GST在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。此外,因为GST具有GSH-Px活性,亦称为non-Se GSH-Px,具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质等的功能。注意,GST催化的反应减少GSH含量,但是不增加GSSG含量。

测定原理:

GST催化GSH与CDNB结合,其结合产物的光吸收峰波长为340nm;通过测定340nm波长处吸光度上升速率,即可计算出GST活性。

自备仪器和用品:

低温离心机、水浴锅、可调节移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水。

试剂组成和配置:

试剂一:液体120mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体22mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加2 mL蒸馏水溶解。

粗酶液提取:

  1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

  2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3.  血清等液体:直接测定。

测定:

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到340 nm,用蒸馏水调零。

2. 试剂三放在25℃(一般物种)或者37℃(哺乳动物)保温。

3. 测定管:取微量石英比色皿或96孔板,加入20μL上清液,180μL试剂二和20μL试剂三,迅速混匀后于340nm测定吸光度变化,记录10 s和310 s吸光度为A1和A2。

GST活性计算公式:

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

(1). 按蛋白浓度计算

活性单位定义:在25℃或者37℃中,每毫克蛋白每分钟催化1nmol/L CDNB与GSH结合为1个酶活单位。

GST(nmol/min/mg prot)=(A2-A1)÷ε÷d×109×V反总÷(Cpr×V样)÷T

=230×(A2-A1) ÷Cpr

(2). 按样本质量计算

活性单位定义:在25℃或者37℃中,每克样品每分钟催化1nmol/L CDNB与GSH结合为1个酶活单位。

GST(nmol/min/g 鲜重)=(A2-A1)÷ε÷d×109×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T

=230×(A2-A1)÷W

(3)按细胞数量计算

活性单位定义:在25℃或者37℃中,每104个细胞每分钟催化1nmol/L CDNB与GSH结合为1个酶活单位。

GST(nmol/min/104 cell)=(A2-A1)÷ε÷d×109×V反总÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

=230×(A2-A1) ÷细胞数量

(4)按液体体积计算

活性单位定义:在25℃或者37℃中,每毫升液体每分钟催化1nmol/L CDNB与GSH结合为1个酶活单位。

GST(nmol/min/mL)=(A2-A1)÷ε÷d×109×V反总÷V样÷T

                   = 230×(A2-A1)

ε:产物摩尔消光系数,9.6×103 L/mol /cm;d:比色皿光径,1cm;106:1mol=1×106μmol;V反总:反应体系总体积,220μL=2.2×10-4 L;Cpr:上清液蛋白质浓度(mg/mL),需要另外测定,建议选用本公司生产的BCA蛋白质浓度测定试剂盒;W :样品质量;V样:加入反应体系中上清液体积,20μL=0.02 mL;V样总:提取液体积,1 mL;T:反应时间(min),5min。

b.使用96孔板测定的计算公式如下

(1). 按蛋白浓度计算

活性单位定义:在25℃或者37℃中,每毫克蛋白每分钟催化1nmol/L CDNB与GSH结合为1个酶活单位。

GST(nmol/min/mg prot)=(A2-A1)÷ε÷d×109×V反总÷(Cpr×V样)÷T

=460×(A2-A1) ÷Cpr

(2). 按样本质量计算

活性单位定义:在25℃或者37℃中,每克样品每分钟催化1nmol/L CDNB与GSH结合为1个酶活单位。

GST(nmol/min/g 鲜重)=(A2-A1)÷ε÷d×109×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T

=460×(A2-A1)÷W

(3)按细胞数量计算

活性单位定义:在25℃或者37℃中,每104个细胞每分钟催化1nmol/L CDNB与GSH结合为1个酶活单位。

GST(nmol/min/104 cell)=(A2-A1)÷ε÷d×109×V反总÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

=460×(A2-A1)÷细胞数量

(4)按液体体积计算

活性单位定义:在25℃或者37℃中,每毫升液体每分钟催化1nmol/L CDNB与GSH结合为1个酶活单位。

GST(nmol/min/mL)=(A2-A1)÷ε÷d×109×V反总÷V样÷T

                   =460×(A2-A1)

ε:产物摩尔消光系数,9.6×103 L/mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;106:1mol=1×106μmol;V反总:反应体系总体积,220μL=2.2×10-4 L;Cpr:上清液蛋白质浓度(mg/mL),需要另外测定,建议选用本公司生产的BCA蛋白质浓度测定试剂盒;W :样品质量;V样:加入反应体系中上清液体积,20μL=0.02 mL;V样总:提取液体积,1 mL;T:反应时间(min),5min。

注意事项:

1. 样品处理等过程均需要在冰上进行,且须在当日测定酶活力;

2. 细胞中GST活性测定时,细胞数目须在300万-500万之间,细胞中GST的提取时可加试剂一后研磨或超声波处理,不能用细胞裂解液处理细胞;

3. 本法测定GST活性的线性范围可达76 μmol/min /L,测定前先用1~2个样做预实验,如5min内反应不成线性,须对样品用蒸馏水稀释,计算结果乘以稀释倍数;

4. 测定反映的温度对测定结果有影响,请控制在25℃或者37℃(哺乳动物)。


上海牧荣生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

谷胱甘肽S转移酶(GST)测试盒

产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
扫一扫,关注微信
地址:上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 传真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧荣生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2022017655号-1