您好!欢迎访问上海牧荣生物科技有限公司网站!
咨询热线

17621170138

当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > 硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒

硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒

简要描述:硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-09
  • 访  问  量:46

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒

微量法100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

TPX属于过氧化物酶家族,在体内主要通过还原过氧化氢和一些氢过氧化物来实现抗氧化作用,功能与GPX类似,也是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。TPX普遍存在于各种生物体内,如酵母、植物、动物、原生动物、寄生虫、细菌和古细菌,在进化上高度保守。TPX与细胞增殖、分化、细胞凋亡及肿瘤发生调控密切相关。TPX的主要功能包括细胞脱毒、抗氧化和调节由过氧化氢介导的信号转导和免疫反应。

测定原理:

TPX催化H2O2氧化二硫苏糖醇(DTT),H2O2的吸收波长为240nm,通过测定240nm吸光度的下降速率,即可计算出TPX活性。

自备仪器和用品:

低温离心机、水浴锅、可调节移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、和蒸馏水

试剂组成和配制:

试剂一:液体120mL×1瓶,室温保存。

试剂二:液体20mL×1瓶,- 20℃保存。

试剂三:液体2mL×1支,4℃。

粗酶液提取:

组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

血清等液体:直接测定。

TPX测定操作:

取微量石英比色皿或96孔板,加入4 μL上清液,180 μL试剂二,16 μL试剂三,迅速混匀后于240 nm测定10s和130s吸光度,记为A1和A2。

TPX活性计算公式:

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

(1). 按蛋白浓度计算

活性单位定义:25℃或者37℃中,每毫克蛋白每分钟催化1nmol H2O2降解为1个酶活单位。

TPX(nmol/min /mg prot)=(A1-A2)÷ε÷d×V反总÷(Cpr×V样)÷T

=573×(A1-A2)÷Cpr

(2). 按样本质量计算

活性单位定义:25℃或者37℃中,每克样本每分钟催化1nmol H2O2降解为1个酶活单位。

TPX活性(nmol/min/g 鲜重)=(A1-A2)÷ε÷d×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T

=573×(A1-A2)÷W

(3)按细胞数量计算

活性单位定义:25℃或者37℃中,每104个细胞每分钟催化1nmol H2O2降解为1个酶活单位。

TPX活性(nmol/min/104 cell)=(A1-A2)÷ε÷d×V反总÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

=573×(A1-A2)÷细胞数量

(4)按液体体积计算

活性单位定义:25℃或者37℃中,每毫升液体每分钟催化1nmol H2O2降解为1个酶活单位。

TPX活性(nmol/min /mL)=(A1-A2)÷ε÷d×V反总÷V样÷T

=573×(A1-A2)

ε:H2O2的摩尔消光系数,43600 L/mol/cm=0.0436 L/μmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应体系总体积(L),200 μ L=2×10-4 L;Cpr:上清液蛋白质浓度(mg/mL);W :样品质量;V样:加入反应体系中上清液体积(mL),4 μL=4×10-3 mL;V样总:提取液体积,1 mL;T:反应时间(min),2min。

b.使用96孔板测定的计算公式如下

(1). 按蛋白浓度计算

活性单位定义:25℃或者37℃中,每毫克蛋白每分钟催化1nmol H2O2降解为1个酶活单位。

TPX活性(nmol/min /mg prot)=(A1-A2)÷ε÷d×V反总÷(Cpr×V样)÷T

=1146×(A1-A2)÷Cpr

(2). 按样本质量计算

活性单位定义:25℃或者37℃中,每克样本每分钟催化1nmol H2O2降解为1个酶活单位。

TPX活性(nmol/min/g 鲜重)=(A1-A2)÷ε÷d×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T

=1146×(A1-A2)÷W

(3)按细胞数量计算

活性单位定义:25℃或者37℃中,每104个细胞每分钟催化1nmol H2O2降解为1个酶活单位。

TPX活性(nmol/min/104 cell)=(A1-A2)÷ε÷d×V反总÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

=1146×(A1-A2)÷细胞数量

(4)按液体体积计算

活性单位定义:25℃或者37℃中,每毫升液体每分钟催化1nmol H2O2降解为1个酶活单位。

TPX活性(nmol/min /mL)=(A1-A2)÷ε÷d×V反总÷V样÷T

=1146×(A1-A2)

ε:H2O2的摩尔消光系数,43600 L/mol/cm=0.0436 L/μmol/cm;d:96孔板光径,0.5cm;V反总:反应体系总体积(L),200 μL=2×10-4 L;Cpr:上清液蛋白质浓度(mg/mL);W :样品质量;V样:加入反应体系中上清液体积(mL),4 μ L=4×10-3 mL;V样总:提取液体积,1 mL;T:反应时间(min),2min。


上海牧荣生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒




产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
扫一扫,关注微信
地址:上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 传真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧荣生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2022017655号-1