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淀粉分支酶(SBE)测试盒

简要描述:淀粉分支酶(SBE)测试盒 淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

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  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-09
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

淀粉分支酶(SBE)测试盒

微量法100管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义

SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是参与支链淀粉合成的关键酶,测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。

测定原理

直链淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收,SBE使直链淀粉含量减少,从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值,一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。

需自备的的仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制

提取液液体100mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体10mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1支,4℃保存;临用前每支加入1mL蒸馏水,95℃沸水浴充分溶解后备用;用不完的试剂4℃保存;

试剂三:液体13mL×1瓶,4℃保存;

试剂四:液体1mL×1瓶,4℃保存;

粗酶液提取

按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤

1、分光光度计预热30min以上,调节波长到660 nm,蒸馏水调零。

2、加样表

试剂名称(μL)

对照管

测定管

95℃水浴1min后灭活的粗酶液

65


粗酶液


65

试剂一

85

85

试剂二

10

10

混匀,37℃准确保温20 min,置95℃水浴中5 min(盖紧,防止水分散失),冷却

试剂三

130

130

试剂四

10

10

混匀,室温静置10min,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,660nm处读取各管吸光值。每个测定管需设个一个对照管。

注意:

1、可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行5min 95℃沸水浴处理。2、试剂二如有沉淀,务必沸水浴溶解后使用。

SBE活力单位的计算

1、按照蛋白浓度计算

单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反应体系中每降低1%碘蓝值为一个酶活性单位。

SBE活性(U/mg prot)=( A对照管-A测定管)/A对照管÷Cpr ×100

2、按照样本鲜重计算

单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每g组织在反应体系中每降低1%碘蓝值为一个酶活性单位。

SBE活性(U/g 鲜重)=(A对照管-A测定管)/A对照管÷(W÷V样总)×100

V样总:提取液总体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。

上海牧荣生物科技有限公司

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淀粉分支酶(SBE)测试盒




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