您好!欢迎访问上海牧荣生物科技有限公司网站!
咨询热线

17621170138

当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > 总RNA提取试剂

总RNA提取试剂

简要描述:总RNA提取试剂:RNApure(TRIzol)实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。本试剂适用范围广泛

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-06-07
  • 访  问  量:90

详细介绍

品牌其他品牌供货周期一个月
应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

RNApure(TRIzol)是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。本试剂适用范围广泛,可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等 样品中提取总RNA。样品在RNApure中被充分裂解的同时能够***限度地保证RNA的完整性。在加入氯仿离心后,溶液会分成三层:上层无色水相、中间层和下层红色有机相, RNA分布在上清层中。收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总 RNA完整性好,无蛋白和DNA污染,可用于各种分子生物学常规实验,如RT-PCR、 Real-time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等。

自备试剂

氯仿(新开封或提取 RNA 专用)、无水乙醇。 

操作步骤

1.各种材料的处理

1)植物组织:取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在 RNApure中迅速研磨,每 30-50 mg 组织加入 1ml RNApure,涡旋混匀。

注意:样品体积一般不要超过 RNApure 体积的 10%。

2)动物组织:取新鲜或-70℃冻存的动物组织尽量剪碎,每 30-50mg 组织加入 1mlRNApure,匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入 1ml RNApure 混匀。

注意:样品体积一般不要超过 RNApure 体积的 10%。

3)单层培养细胞:吸去培养液,可直接在培养板中加入适量 RNApure(每 10cm²面积需要 1ml RNApure),用取样器反复吹打使细胞裂解。也可用胰蛋白酶处理后,将细胞溶液转移至 Rnase-free 的离心管中,13000×g 离心 5 分钟,收集细胞沉淀,仔细吸除所有上清,加入 1ml RNApure 混匀。

注意:a. 收集细胞数量不要超过 1×10⁷。

b. RNApure 加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定。如果 RNApure 加量不足,可能导致提取的 RNA 中有 DNA 污染。

c. 收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净,否则会导致裂解不全,造成 RNA 的产量降低。

4)细胞悬液:离心收集细胞。每 5×10⁶-1×10⁷动物、植物和酵母细胞或每 10⁷细菌细胞加入 1 ml RNApure。

注意:

a. 加入 RNApure 前不要洗涤细胞,以免 RNA 降解。

b. 一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪或液氮研磨处理。

5)血液处理:直接取新鲜的血液,加入 3 倍体积 RNApure(推荐 0.25ml 全血加入 0.75mlRNApure),充分振荡混匀。

6)可选步骤:对于蛋白、脂肪、多糖或胞外物质含量高的样品,如肌肉组织、脂肪组织或植物的块茎,可以在匀浆处理后 4℃,13,000×g 离心 10 分钟以除去不溶物质,此时沉淀中含胞外物质、多糖和高分子量的 DNA,而 RNA 存在于上清中。

2.样品中加入 RNApure 后反复吹打几次,使样本充分裂解。室温放置 5 分钟,使蛋白核酸复合物*全分离。

3.以每 1ml RNApure 加入 200ul 氯仿的比例加入氯仿,盖好管盖,剧烈振荡 15 秒,室温放置 2 分钟。

4.4℃ 13,000×g 离心 10 分钟,此时样品分为三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA 主要在上层水相中,将上层水相移到一个新的 Rnase-free 离心管(自备)中。

5.在得到的水相溶液中加入等体积异丙醇,颠倒混匀,室温放置 10 分钟。

6.4℃ 12,000×g 离心10分钟,弃上清。

7.加入75%乙醇(用Rnase-free Water配制)洗涤沉淀。每使用1ml RNApure用1ml75%乙醇对沉淀进行洗涤。

8.4℃ 12,000×g 离心3分钟,小心吸弃上清,注意不要吸弃RNA沉淀。

注意:剩余的少量液体可短暂离心,然后用枪头吸出,注意不要吸弃沉淀。

9.室温放置 2-3 分钟,晾干。加入 30-100ul Rnase-free Water,充分溶解 RNA,得到的RNA 保存在-70℃,防止降解。

注意:沉淀不要过分干燥,以免难于溶解。

本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途


上海牧荣生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

总RNA提取试剂









































































































































































































































































































































































产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
扫一扫,关注微信
地址:上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 传真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧荣生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2022017655号-1