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详细介绍
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | M3150.0200 |
|---|---|---|---|
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 化工,生物产业,制药/生物制药 |
GreenMasterMix FAST，不含 ROX，可在所有常见模块系统中使用无探针的实时荧光定量 PCR。该预混液设计用于快速 qPCR，变性时间短，采用两步法 PCR 方案。我们的不含 ROX 的 GreenMasterMix 包含嵌入荧光染料和进行定量 PCR 所需的所有组分。
Genaxxon GreenMasterMix 中使用的 HotStart Taq 聚合酶的优势：
热启动技术，用于在室温下构建。
初始变性时间短，为 2 分钟或更短
针对 2 步法 PCR 方案进行了优化
无需在冰上移液
无需立即进一步处理 （PCR）。移液式 PCR 方法可以在 RT 中放置长达 3 天。
扩增富含 GC 的模板
高产
无引物二聚体形成
Genaxxon 热启动 Taq DNA 聚合酶具有便利性和实用性，可实现一致的效率和特异性：
1。它在低温下抑制聚合酶，从而可靠地防止非特异性 PCR 反应。因此，PCR 设置不必在冰上进行。
2. 这意味着 PCR 方法可以在 RT（20°C 至 25°C）下混合并储存长达 3 天，而不会影响最终结果（例如，在午休期间或等待更多样品时）。
不含 ROX 的 Green qPCR 预混液包含进行定量 PCR 所需的所有组分，含量经过优化。
热启动 Taq DNA 聚合酶
dATP、dCTP、dGTP、dTTP
插层绿色荧光染料
优化的反应缓冲液
稳定剂和增强剂，可实现低拷贝数靶标的扩增
1 mL 的小等分试样简化了处理和储存（每个等分试样的冻融循环次数更少）。
特别适用于：BioRad CFX96 Touch™、CFX384 Touch™、CFX Connect™、DNA Engine Opticon® 2、Chromo4™、iCycler iQ™ 和 My iQ™、Roche LightCycler® 480、LightCycler® 1536、LightCycler® Nano、LightCycler® 96 和 QuantStudio™ 仪器、Thermo Scientific™ PikoReal™、Cepheid SmartCycler®、Bio Molecular Systems Mic qPCR 循环仪、Qiagen Rotor Gene Q、Rotor Gene 6000、MyGo Mini 和 MyGo Pro。
规格：
该实时荧光定量 PCR 预混液为即用型 2 时间预混液，不含 ROX™
，适用于使用 MIC Cycler 进行 FAST PCR
初始变性时间
短，针对 2 步法 qPCR
优化，等分试样大小：1 mL。
PCR 引物延伸 多重 PCR 低拷贝靶标 PCR 实时荧光定量 PCR
One unit is defined as the amount of enzyme which will convert 10 nmoles of dNTPs to an acid-insoluble form in 30 min at 72°C under the assay conditions (25 mM TAPS (tris-(hydroxymethyl)-methyl-amino-propanesulfonic acid, sodium salt) pH 9.3 (25°C); 50 mM KCl; 2 mM MgCl2; 1 mM b-mercaptoethanol; and activated calf thymus DNA as substrate.
eclass-Nr: 32-16-05-02
技巧
快速 PCR：
在进行快速实时荧光定量 PCR 时，考虑引物设计和靶标大小非常重要。为了在快速循环条件下进行高效扩增，建议靶标大小在 70 bp 至 200 bp 之间。目标长度越短，总运行时间越快。对于其他靶标和其他引物组，必须通过实验确定退火步骤。
请使用以下方案作为灵感，因为您需要根据您的目标大小和应用的仪器优化仪器设置。
在 LightCycler® 96 上使用 Genaxxon 预混液（不含 ROX）快速获得实时 PCR 结果
使用 LighCycler96 （Roche） 使用快速循环实时 2 步方案对不含 ROX 的 GreenMasterMix （2X） 或不含 ROX 的 ProbeMasterMix （2X） 进行了测试;分别为快速 PAH12 Green LC 和快速 Pthr 探针 LC。
qPCR 设置：使用 GreenMasterMix （2X）（不含 ROX）或 ProbeMasterMix （2X）（不含 ROX），靶向 PAH12 （203 bp） 或 Pthr （75 bp） 的引物和 4 种浓度的 gDNA（40 ng、20 ng、10 ng 和 5 ng）。所有 DNA 浓度均以四次重复测试。见图 1 和图 2。PCR 反应混合物在 LightCycler® 96 上运行（对 ROX 无要求）。所应用快速方案的仪器设置、运行时间和质量标准;将 Fast PAH12 Green LC 和 Fast Pthr 探针 LC 与标准方案进行比较;标准 Pthr LC。见表 1.结果
：标准 Fast Pthr 探针 LC 方案的运行时间为 80.8 分钟。快速 PAH12 绿色液相色谱和快速 Pthr 探针液相色谱方案的运行时间分别为 47.5 和 40.8 分钟。所有协议时间均包括 samping 时间和 15 分钟热启动。如表 1 所示，Fast PAH12 Green LC 和 Fast Pthr Probe LC 方案的确定标准令人满意。此外，使用不含 ROX 的 Green 2x 预混液和快速 PAH12 Green 液相色谱方案进行的熔解曲线分析证实了高特异性。
在 -20°C 下储存。 仅供实验室使用！
上海牧荣生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域，以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及，细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。
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