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总糖含量测试盒

简要描述:总糖含量测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
  • 访  问  量:96

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

总糖含量测试盒

微量法 100管/96样

正式测定前请选择2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖也可称为碳水化合物,包括可溶性的单糖,二糖以及不溶性的淀粉,纤维素,几丁质等。

测定原理:

总糖酸水解为还原糖,在NaOH和丙三醇存在下,DNS试剂与还原糖共热后被还原成氨基化合物,在过量的NaOH碱性溶液中呈桔红色,在540nm处有最大吸收峰,以此测定样品中的总糖含量。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。

试剂的组成和配制:

试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体100mL×1瓶 ,4℃保存;

试剂三:液体5mL×1瓶 ,4℃避光保存;

样品中总糖的提取:

组织:称取约0.1g样品,加入1mL 试剂一,1.5mL蒸馏水,匀浆,95℃水浴中加热30min,加入1mL试剂二,混匀,用蒸馏水定容至10mL,8000g 25℃离心10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)

液体样本:取0.1mL样本,加入1mL 试剂一,1.5mL蒸馏水,匀浆,95℃水浴中加热30min,加入1mL试剂二,8000g 25℃离心10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)

测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。

2、调节水浴锅至95度。

3、加样表:

试剂(μL)

空白管

测定管

样本


8

蒸馏水

16

8

试剂三

12

12

混匀,置95度水浴中10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温

蒸馏水

 172

172

混匀,540nm测定吸光值,ΔA=A测定管-A空白管

注意:1、空白管只要做一管。

       2、如果ΔA大于2,需要将上清液用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。

总糖含量计算:

1、标准条件下测定的回归方程为y = 0.3002x - 0.0507;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

2、按样本鲜重计算:

总糖(mg /g鲜重)= [(ΔA+0.0507) ÷0.3002×V1]÷(W×V1÷V2)×稀释倍数=33.311×(ΔA+0.0507) ÷W×稀释倍数。

3、按样本蛋白浓度计算:

总糖(mg /mg prot)=[(ΔA+0.0507) ÷0.3002×V1]÷(V1×Cpr) ×稀释倍数=3.3311×(ΔA+0.0507) ÷Cpr×稀释倍数。

V1:加入样本体积,0.008mL;V2:加入提取液体积,10mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。

4、按照液体体积计算:

总糖(mg /mL)=[(ΔA+0.0507) ÷0.3002×V1]÷(V3×V1÷V2)×稀释倍数=116.59×(ΔA+0.0507)×稀释倍数。

V1:加入样本体积,0.008mL;V2:加入提取液体积,10mL/3.5mL; V3:液体样本,0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。

 

注意:*低检测限为1mg/g鲜重或10ng/mg prot

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