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总胆固醇(TC)含量测试盒

简要描述:总胆固醇(TC)含量测试盒 总胆固醇(total cholesterol,TC)含量测定试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

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  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

总胆固醇(TC)含量测试盒

微量法 100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

TC包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。

测定原理:

利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;最后利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰,其颜色深浅与TC含量成正比。

自备仪器和用品:

水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板。

试剂组成和配置:

试剂一:异丙醇100mL(自备);

试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;

试剂四:液体40μL×1瓶,4℃保存;

TC标准品:液体1mL×1支,0.5μmol/mL,4℃保存。

TC的提取:

1、组织中TC的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心10min,取上清,即TC待测液。

2、细胞、细菌中TC的提取:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s),即TC待测液。

3、血清(浆)等样品:直接测定。

测定操作:

1. /酶标仪预热30 min,调节波长到500 nm。

2. TC工作液的配制临用前,吸取约0.8mL试剂二分别加入试剂三试剂四瓶中,充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中,充分混匀,TC工作液置于37℃水浴10min。用不完的工作液4℃保存一周。

3. 标准管:依次在96孔板中加入20μL FC标准液和180μL TC工作液,混匀,37℃静置3h后于500nm测定A标准管。

4. 测定管:依次在96孔板中加入20μL FC待测液和180μLTC工作液,混匀,37℃静置3h后于500nm测定A测定管。

5. 空白管:依次在96孔板中加入20μL 试剂一和180μLTC工作液,混匀,37℃静置3h后于500nm测定A测定管。

 

注意:标准管和空白管只需测定一次。

计算公式:

1. 血清(浆)中TC含量计算:

TC(μ mol /dL)=C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)×100

 =50×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)

C标准液:0.5μmol/mL;100 mL:1dL=100 mL。

2. 组织中TC含量计算:

(1)按样本蛋白浓度计算

TC(μ mol / mg prot)= C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr

    = 0.5×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr

(2)按样本质量计算

TC(μ mol / g 鲜重)= C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W

    = 0.5×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W

C标准液:0.5μmol/mL;样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g/mL

3. 细胞、细菌中TC含量计算:

TC(μ mol /104 cell)=C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷细菌或细胞(104 cell /L)

    =0.5×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷细菌或细胞(104 cell /L)

C标准液:0.5μmol/mL。

*低检出限为1nmol/mL。


上海牧荣生物科技有限公司

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