总胆固醇（TC）含量测试盒

总胆固醇（TC）含量测试盒

微量法 100T/96S

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

TC包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。

测定原理：

利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇（FC）和游离脂肪酸（FFA），从而把胆固醇酯转化为FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-胆甾烯酮和H2O2；最后利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在500nm有特征吸收峰，其颜色深浅与TC含量成正比。

自备仪器和用品：

水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板。

试剂组成和配置：

试剂一：异丙醇100mL（自备）；

试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存；

试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；

试剂四：液体40μL×1瓶，4℃保存；

TC标准品：液体1mL×1支，0.5μmol/mL，4℃保存。

TC的提取：

1、组织中TC的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心10min，取上清，即TC待测液。

2、细胞、细菌中TC的提取：先收集400-500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强度20％，超声2s，停1s），即TC待测液。

3、血清（浆）等样品：直接测定。

测定操作：

1. /酶标仪预热30 min，调节波长到500 nm。

2. TC工作液的配制：临用前，吸取约0.8mL试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中，充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中，充分混匀，TC工作液置于37℃水浴10min。用不完的工作液4℃保存一周。

3. 标准管：依次在96孔板中加入20μL FC标准液和180μL TC工作液，混匀，37℃静置3h后于500nm测定A标准管。

4. 测定管：依次在96孔板中加入20μL FC待测液和180μLTC工作液，混匀，37℃静置3h后于500nm测定A测定管。

5. 空白管：依次在96孔板中加入20μL 试剂一和180μLTC工作液，混匀，37℃静置3h后于500nm测定A测定管。

注意：标准管和空白管只需测定一次。

计算公式：

1. 血清（浆）中TC含量计算：

TC（μ mol /dL）=C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）×100

 =50×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）

C标准液：0.5μmol/mL；100 mL：1dL=100 mL。

2. 组织中TC含量计算：

(1)按样本蛋白浓度计算

TC（μ mol / mg prot）= C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷Cpr

    = 0.5×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷Cpr

(2)按样本质量计算

TC（μ mol / g 鲜重）= C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷W

    = 0.5×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷W

C标准液：0.5μmol/mL；样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g/mL

3. 细胞、细菌中TC含量计算：

TC（μ mol /104 cell）=C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷细菌或细胞（104 cell /L）

    =0.5×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷细菌或细胞（104 cell /L）

C标准液：0.5μmol/mL。

*低检出限为1nmol/mL。

上海牧荣生物科技有限公司

1. 国内试剂耗材经销代理。

2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

4. 进出口货物代理服务。

5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。

7. 公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。

总胆固醇（TC）含量测试盒