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赖氨酸(LYS)测试盒

简要描述:赖氨酸(LYS)测试盒 赖氨酸(lysine,Lys)含量测定试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-08
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

赖氨酸(LYS)测试盒

微量法 100管/96样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

赖氨酸是人体必需氨基酸之一,能促进人体发育、增强免疫功能,并有提高中枢神经组织功能的作用。赖氨酸为碱性必需氨基酸。由于谷物食品中的赖氨酸含量甚低,且在加工过程中易被破坏而缺乏,故称为第一限制性氨基酸。

测定原理:

蛋白质中的赖氨酸具有一个游离的ε-NH2,它与茚三酮试剂反应生成蓝紫色物质,其颜色的深浅在一定范围内与赖氨酸的含量成线性关系。亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目相同,而且仅有—个游离氨基(ε-NH2),所以通常用亮氨酸配制标准液。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水、水浴锅。

试剂的组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入12.5mL试剂三充分溶解混匀;

试剂二:液体12.5mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体15mL×1瓶,4℃保存;

试剂四:60%乙醇,自备。

赖氨酸提取:

样本烘干粉碎,称取约0.01g样本,加入1mL提取液,充分匀浆。80℃水浴提取20min,冷却后10000g离心10min,取上清待测。

测定步骤

  1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至570nm,蒸馏水调零。

  2. 工作液的配制:取10mL试剂一与10mL试剂二混合摇匀,取上清备用。用不完的试剂4℃保存。

  3. 在有盖EP管中加入下列试剂:

试剂名称(μL)

测定管

空白管

样本

100


提取液


100

工作液

200

200

混匀,80℃水浴30min(盖紧,以防止水分散失),冷却至常温。

试剂四

300

300

混匀,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中,于530nm波长处记录吸光值A。△A=A测定管-A空白管。空白管只要做一管。


赖氨酸含量计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为y = 0.0062x - 0.0212;x为赖氨酸含量(µg/mL),y为吸光值。

1.按照蛋白浓度计算

赖氨酸含量(µg/mg prot)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(Cpr ×V1)×1.1515

=185.73×(△A+0.0212) ÷Cpr

2.按照样本质量计算

赖氨酸含量(µg/g干重)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(W ×V1÷V2)×1.1515

=185.73×(△A+0.0212) ÷W

V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;1.1515,校正系数。

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为y = 0.0031x - 0.0212;x为赖氨酸含量(µg/mL),y为吸光值。

1.按照蛋白浓度计算

赖氨酸含量(µg/mg prot)=[(△A +0.0212)÷0.0031×V1]÷(Cpr ×V1)×1.1515

=371.45×(△A+0.0212) ÷Cpr

2.按照样本质量计算

赖氨酸含量(µg/g干重)= [(△A +0.0212)÷0.0031×V1]÷(W ×V1÷V2)×1.1515

=371.45×(△A+0.0212) ÷W

V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;1.1515,校正系数。


上海牧荣生物科技有限公司

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赖氨酸(LYS)测试盒

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