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维生素E测试盒

简要描述:维生素E测试盒 维生素E(Vitamin E,VE)试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-08
  • 访  问  量:123

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

维生素E测试盒

微量法100T/48S

测定意义

维生素E(Vitamin E)是一种脂溶性维生素,其水解产物为生育酚,是生物体中最主要的抗氧化剂之一,能阻止不饱和脂肪酸收到过氧化作用的损伤,维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能,具有延缓衰老、预防溶血性贫血作用,在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。

测定原理

VE还原Fe3+为Fe2+,Fe2+与1,10-菲罗啉产生有色络合物,在530nm有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、漩涡震荡仪。

试剂组成和配制

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体2mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体2mL×1支,4℃保存。

试剂三:液体2mL×1支,4℃保存。

试剂四:液体6mL×1瓶,4℃保存。

样本处理

  1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,匀浆后用提取液定至1mL,定至在漩涡混匀仪上震荡5min,于25℃,5000g离心10min,取上层测定。

  2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min)后在漩涡混匀仪上震荡5min,于25℃,5000g离心10min,取上层测定。

  3. 血清:取0.1mL,加0.9mL提取液,漩涡仪混匀上震荡5min,于25℃,5000g离心10min,取上层测定。

测定操作


对照管

测定管

样品(μL)

100

100

试剂一(μL)

20

20

试剂二(μL)


20

试剂三(μL)

20


充分混匀,25℃反应5min

试剂四(μL)

60

60

充分混匀,于微量石英比色皿/96孔板,无水乙醇调零,测定530nm处吸光值,记为A对照管和A测定管,△A=A测定管-A对照管。

计算公式

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.22x + 0.0065 R2 = 0.9978

1. 按照蛋白含量计算

VE含量(μg/mg prot)=(△A -0.0065)÷ 0.22×V反总÷(V样×Cpr)

= 9.09×(△A -0.0065)÷ Cpr

2. 按照样本质量计算

VE含量(μg/g)= (△A -0.0065)÷ 0.22×V反总÷(V样×W÷V样总)

= 9.09×(△A -0.0065)÷ W

3. 按照细胞数量计算

VE含量(μg/104 cell)=(△A -0.0065)÷ 0.22×V反总÷(V样×细胞数量÷V样总)

= 9.09×(△A -0.0065)÷ 细胞数量

4. 按照液体体积计算

VE含量(μg/mL)=(△A -0.0065)÷ 0.22×V反总÷V样×10

= 90.9×(△A -0.0065)

V反总:反应总体积,0.2mL;V样:加入样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g

  1. 用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.11x + 0.0065 R2 = 0.9978

1. 按照蛋白含量计算

VE含量(μg/mg prot)=(△A -0.0065)÷ 0.11×V反总÷(V样×Cpr)

= 18.18×(△A -0.0065)÷ Cpr

2. 按照样本质量计算

VE含量(μg/g)= (△A -0.0065)÷0.11×V反总÷(V样×W÷V样总)

= 18.18×(△A -0.0065)÷ W

3. 按照细胞数量计算

VE含量(μg/104 cell)=(△A -0.0065)÷ 0.11×V反总÷(V样×细胞数量÷V样总)

= 18.18×(△A -0.0065)÷ 细胞数量

4. 按照液体体积计算

VE含量(μg/mL)=(△A -0.0065)÷0.11×V反总÷V样×10

= 181.8×(△A -0.0065)

V反总:反应总体积,0.2mL;V样:加入样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g

注意事项

若反应体系产生沉淀,需要将样品进行适当的稀释,并在计算公式中乘以稀释倍数。


上海牧荣生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

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