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游离胆固醇(FC)含量测试盒

简要描述:游离胆固醇(FC)含量测试盒 游离胆固醇(free cholesterol, FC)含量测定试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

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  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-09
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

游离胆固醇(FC)含量测试盒

微量法 100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

FC是构成细胞膜的主要成分,也是合成肾上腺皮质激素性激素胆汁酸维生素D生理活性物质的重要原料。FC浓度可作为脂代谢的指标。

测定原理:

FC氧化酶催化FC生成△4-胆甾烯酮和H2O2,过氧化物酶催化H2O24-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物,在500nm有吸收峰,其颜色深浅与FC含量成正比。

自备仪器和用品:

水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板、异丙醇和蒸馏水。

试剂组成和配置:

试剂一:异丙醇100mL(自备);

试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;

试剂四:液体40μL×1瓶,4℃保存;

TC标准品:液体1mL×1支,0.5μmol/mL,4℃保存。

FC的提取:

  1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。

2.细菌、真菌:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s),即FC待测液。

3.血清(浆)样品:直接测定。

测定操作:

1. 酶标仪预热30 min,调节波长到500 nm。

2. FC工作液的配制临用前,吸取约0.8mL试剂二分别加入试剂三试剂四瓶中,充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中,充分混匀,FC工作液置于37℃水浴10min。用不完的工作液4℃保存一周。

3. 标准管:依次在96孔板中加入20μL FC标准液和180μL FC工作液,混匀,37℃静置3h后于500nm测定A标准管。

4. 测定管:依次在96孔板中加入20μL FC待测液和180μL FC工作液,混匀,37℃静置3h后于500nm测定A测定管。

5、空白管:依次在96孔板中加入20μL 试剂一和180μL FC工作液,混匀,37℃静置3h后于500nm测定A测定管。


注意事项:

  1. 标准管和空白管只要做一管。

  2. 若测定管产生白色浑浊,可以将待测液用异丙醇稀释2~5倍后测定,并在最后结果乘以相应倍数。

计算公式:

1. 血清(浆)中FC含量计算:

FC含量(μmol /dL)= C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)×100mL

=50×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)

C标准液:0.5μmol/mL;100 mL:1dL=100 mL。

2. 组织FC含量计算:

(1)按样本蛋白浓度计算

FC含量(μmol / mg prot)= C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr

= 0.5×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

FC含量(μmol / g 鲜重)= C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W

= 0.5×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W

C标准液:0.5μmol/mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g/mL

3. 细胞、细菌中FC含量计算:

FC含量(μmol /104 cell)= C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷细菌或细胞(104 cell /L)

=0.5×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷细菌或细胞(104 cell /L)

C标准液:0.5μmol/mL。

*低检出限为1nmol/mL。

上海牧荣生物科技有限公司

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