您好!欢迎访问上海牧荣生物科技有限公司网站!
咨询热线

17621170138

当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > 淀粉脱分支酶(DBE)测试盒

淀粉脱分支酶(DBE)测试盒

简要描述:淀粉脱分支酶(DBE)测试盒 淀粉脱分支酶(Starch debranching enzyme,DBE)试剂盒上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-09
  • 访  问  量:150

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

淀粉脱分支酶(DBE)测试盒

微量法100管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义

DBE能够专一性地裂解支链淀粉的α-1,6糖苷键,产生线性的葡萄糖链,在调整支链淀粉分子的链长方面有重要的作用。

测定原理

采用3,5-二硝基水杨酸法测定DBE催化支链淀粉产生的还原糖,通过测定还原糖含量的变化来计算DBE活性。

需自备的的仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制

提取液液体100mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体15mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1支,4℃保存;临用前每支加入6mL试剂一,充分混匀后备用;用不完的试剂4℃保存;

试剂三:液体12mL×1瓶,4℃保存;

试剂四:液体35mL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提取

按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长到540 nm,蒸馏水调零。

2、加样表

试剂名称(μL)

对照管

测定管

95℃水浴5min后灭活的样本

100


粗酶液


100

试剂一

100


试剂二


100

混匀,37℃准确保温2h

试剂三

100

100

试剂四

300

300

混匀,95℃水浴5min,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,540nm处读取各管吸光值。ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设个一个对照管。

注意:可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行5min 95℃沸水浴处理。

DBE活力单位的计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件测定回归方程为y = 3.8458x - 0.165;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

(1)按照蛋白浓度计算

单位的定义:每mg组织蛋白每h催化产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

DBE活力(mg /min /mg prot)=[ (ΔA+0.165)÷3.8458×V反总]÷(V样×Cpr)÷T

=0.26× (ΔA+0.165) ÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

DBE活力(mg /min /g鲜重)=[ (ΔA+0.165)÷3.8458×V反总]÷(W× V样÷V样总)÷T

=0.26× (ΔA+0.165) ÷W

V反总:反应体系总体积,0.2mL; V样:加入样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。


b.96孔板测定的计算公式如下

标准条件测定回归方程为y = 1.9229x - 0.165;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

(1)按照蛋白浓度计算

单位的定义:每mg组织蛋白每h催化产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

DBE活力(mg /min /mg prot)=[ (ΔA+0.165)÷1.9229×V反总]÷(V样×Cpr)÷T

=0.52× (ΔA+0.165) ÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

DBE活力(mg /min /g鲜重)=[ (ΔA+0.165)÷1.9229×V反总]÷(W× V样÷V样总)÷T

=0.52× (ΔA+0.165) ÷W

V反总:反应体系总体积,0.2mL; V样:加入样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,2 h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。

标准曲线线性范围为0.1mg/mL-1mg/mL。

ΔA线性范围为0.01-1。


上海牧荣生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

淀粉脱分支酶(DBE)测试盒


产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
扫一扫,关注微信
地址:上海市嘉定区安亭镇新源路155弄16号新源商务楼718室 传真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧荣生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备2022017655号-1