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RIPA 裂解液(强)

简要描述:RIPA 裂解液(强) (RIPA Lysis Buffer) 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-09
  • 访  问  量:56

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

RIPA 裂解液(强) (RIPA Lysis Buffer)  


RIPA 裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞、组织快速裂解液。RIPA 裂解液裂解后的蛋白样品可以用于常规的 Western、IP 等。RIPA 裂解液的主要成分为 Tris-Hcl,NaCl,Triton X-100, sodium deoxycholate,SDS,可以有效裂解不同样本并抑制蛋白降解。

RIPA 裂解液 50mL 

运输与保存方法冰袋运输,4℃保存,有效期一年。 

操作说明:对于组织样品

  1. 组织块用冷 PBS 洗涤,去除血污。剪成小块置于匀浆器中。

   2. 加入 10 倍组织体积本试剂(使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂)冰上匀浆。

   3. 将匀浆液转移至 1.5ml 离心管中,振荡。冰浴 30min,期间用移液器反复吹打,确保细胞全裂解。 

   4. 12000g 离心 5min,收集上清,即为总蛋白溶液。 

对于培养细胞样品:

 1. 对于贴壁细胞: 

a.用 PBS 冲洗细胞 2-3 次。最后一次全吸干残留液。

b.加入适当体积的细胞总蛋白提取试剂(使用前数分内加入蛋白酶抑制剂)于培养板、瓶内 3-5 分钟。期间反复晃动培养板、瓶,使试剂与细胞充分接触。 

c.用细胞刮刀将细胞及试剂刮下,收集到 1.5ml 离心管中。 

2. 对于悬浮细胞:离心收集细胞,每 6 孔板细胞加约 250 ul 细胞总蛋白提取试剂(在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂),振荡。 

3. 冰浴 30min,期间每 10 分钟用 200ul 移液器反复吹打数次,确保细胞裂解。 

4. 12000g 离心 5min,收集上清,即为总蛋白。 

注意事项: 

对于组织样品:每 50mg 组织约加入 1ml 的本试剂裂解。对于软骨、皮肤等组织,可适当减少试剂用量,以提高蛋白浓度。 

对于培养细胞样品: 

  1. 正常细胞密度下,每个 6 孔板细胞加入 250ul 左右裂解液。其它类推。

   2. 样本过量时裂解可能会出现较粘稠状。可用移液器反复吹打,直至呈液状为止。如果一直较稠,可再加入适量裂解液,或者使用超声破碎仪。 

   3. 此试剂对人体有害,请适当防护。


上海牧荣生物科技有限公司

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RIPA 裂解液(强) (RIPA Lysis Buffer)  




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