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当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > K61009MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit

MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit

简要描述:MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit
MagVigen唾液DNA提取试剂盒

  • 产品型号:K61009
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-08-21
  • 访  问  量:195

详细介绍

品牌其他品牌货号K61009
供货周期现货应用领域医疗卫生,化工,生物产业,制药

MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit


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产品内容

  • MagVigen唾液DNA捕获纳米颗粒
  • 唾液溶解缓冲液
  • 蛋白酶K
  • 蛋白酶K缓冲液
  • 清洗缓冲液1原液
  • 洗脱缓冲液

所需材料

  • 异丙醇
  • 乙醇
  • 十二烷基硫酸钠,16%
  • 磁性架(NVIGEN目录号A20006)

注意:
MagVigen唾液DNA捕获试剂盒(K61009)可以从唾液样本中捕获DNA (>30bp)。

协议

  1. 准备唾液样本:如果使用冷冻唾液,在室温下融化。将唾液以10000x离心10分钟,以去除任何沉淀。

  2. 制备裂解缓冲液:如果有固体,在60℃加热几分钟,形成澄清溶液。

  3. 制备蛋白酶溶液:向蛋白酶K小瓶中加入蛋白酶K缓冲液。涡旋混合均匀。储存于-20°c

  4. 准备清洗缓冲液1:根据表1计算所需的量。向每550 μl清洗缓冲液1储备液中添加450 μl异丙醇。每次都要做缓冲。

  5. 检查表1中的试剂使用情况。

  6. 将蛋白酶K溶液加入样品管底部,将320 μl唾液样品加入管中,将80μl 1x PBS加入管中。涡旋5秒钟,以充分混合,短暂旋转。

  7. 向试管中加入16% SDS。涡旋5秒钟,以充分混合,短暂旋转。

  8. 向试管中加入唾液溶解缓冲液。涡旋1分钟以充分混合。短暂降速。在60°C的水浴中孵育30分钟。

  9. 添加MagVigen唾液DNA捕获纳米颗粒。轻轻摇动小瓶使其分散。然后加入异丙醇,涡旋混合均匀,短暂减速,并保持低速至中速涡旋45分钟。

  10. 将反应管放在磁性架上,沉淀珠子,直到溶液澄清(大约10分钟,取决于磁体的强度和样品体积)。

  11. 慢慢去除上层清液。注意不要拿走任何珠子,尽可能多地取出溶液。轻敲固体表面上的磁性架,使残留溶液沉淀到试管底部,去除所有上清液。

  12. 从磁铁上取下试管,加入清洗缓冲液1。通过移液或涡旋混合。短暂降速。在磁性架上沉淀珠子(约10分钟),去除上清液。在表面上轻敲磁架。除去所有上清液。


    注意:

    不需要*全分散珠子。用移液器吸头尽可能分散就可以了。

  13. 使用80%的乙醇清洗珠子沉淀。不需要*全分散珠粒。稍微向前和向后倾斜磁性架,使样本管留在磁性架上。然后短暂旋转,使盖子中没有溶液残留。在磁性架上沉淀珠子(约3分钟),并去除所有上清液。轻敲固体表面上的磁性架,将上清液残渣沉淀到试管底部。除去所有上清液。

  14. 使用80%乙醇再次清洗珠子沉淀。沉淀珠子(~ 2-3分钟)并去除所有上清液。

  15. 将试管留在磁性架上,风干沉淀以蒸发所有乙醇。这需要2-3分钟。

  16. 向珠子中加入所需量的洗脱缓冲液,上下吸取,直到所有沉淀*全重新分散。将珠子分散在洗脱缓冲液中3分钟。

  17. 短暂降速。然后将试管放在磁性支架上5分钟。

  18. 在不干扰磁珠沉淀的情况下收集上清液。上清液含有提取的DNA。移出DNA溶液进行下游实验时,将试管放在磁铁旁边。如果不立即使用,提取的DNA溶液可以储存在-20℃下。

表1。每个步骤中使用的试剂体积。

试剂微升
蛋白酶K6
唾液320
1X PBS80
SDS (16%)25
裂解缓冲液190
磁珠28
异丙醇480
清洗缓冲液1160
清洗缓冲液2 / 3 (80%乙醇)160
洗脱示例40
总体积1.2毫升


MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit







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