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当前位置:首页 > 产品中心 > 实验试剂 > 试剂盒 > K61010MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Ex

MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Ex

简要描述:MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Extraction Kit
MagVigen全血、PBMC或细胞基因组DNA提取试剂盒

  • 产品型号:K61010
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-08-21
  • 访  问  量:137

详细介绍

品牌其他品牌货号K61010
供货周期现货应用领域医疗卫生,化工,生物产业,制药

MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Extraction Kit


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产品内容

  • mag vigen DNA捕获纳米颗粒
  • 裂解缓冲液
  • 洗涤缓冲液
  • 洗脱缓冲液
  • 蛋白酶K溶液

需要但不包括的材料

  • 磁性架(NVIGEN目录号A20006)
  • 异丙醇(分子生物学级)
  • 乙醇(200度)
  • 美国公共广播公司

协议

注意:

  • 制备清洗缓冲溶液:在每550 μl清洗缓冲储备液中加入450 μl异丙醇,制成清洗缓冲液。
  • 使用前充分涡旋珠子。
  • 以下方案使用150 μl作为提取起始体积。对于其他体积,请按比例缩放每个步骤中使用的试剂。
  1. 将150 μl样品转移到1.5ml Eppendorf试管中。如果样品量较少,加入PBS补足体积。对于全血样品,即从60 μl或75 μl样品开始,用等体积的PBS稀释。

  2. 加入5 μl蛋白酶K溶液,加入150 μl细胞裂解缓冲液。轻轻混合均匀,并在55℃下孵育30分钟

  3. 向裂解缓冲液中加入5μl MagVigen DNA捕获纳米颗粒。涡旋混合均匀。向裂解反应中加入300 μl异丙醇,涡旋混合。室温下孵育20分钟。

  4. 将样本管放在磁性架上沉淀珠子,直到溶液澄清(约5分钟)。慢慢取出并丢弃上清液。注意不要带走任何珠子,尽可能多地移除溶液。

  5. 从磁铁上取下样本管,加入150 μl清洗缓冲液。通过移液或倒置混合。短暂旋转,使溶液到达试管底部。在磁性架上沉淀珠子,直到溶液澄清(大约1-3分钟),然后去除上清液并丢弃。

  6. 添加150μl 80%乙醇(清洗2),通过移液混合。短暂旋转,使溶液到达试管底部。在磁性架上沉淀珠子,等到溶液澄清,去除上清液并丢弃。

  7. 重复步骤6,用80%乙醇再次清洗(清洗3)。

  8. 将样本管放在磁性架上,风干颗粒约1分钟。

  9. 向珠子中加入50 μl洗脱缓冲液,并充分混合。室温下孵育1分钟。

  10. 将样本管放置在磁性支架上1-2分钟。小心地从Eppendorf管底部收集洗出液,不要扰动沉淀。

  11. 重复步骤9和10进行另一次洗脱。洗出液含有提取的DNA。

注意: 对于要求高样品清洁度的下游应用,将样品放在磁铁旁边,以消除残留珠子的可能性。

表1。每个步骤中使用的试剂体积。

名字体积(微升)体积(微升)
样品(全血、PBMC层或分散在PBS中的细胞)120150
蛋白酶K溶液45
裂解缓冲液120150
磁珠3.24
异丙醇240300
清洗缓冲液(清洗1)120150
新鲜的80%乙醇(清洗2和3)120 x 2150 x 2
洗脱缓冲液,2X40 x 250 x 2

MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Extraction Kit








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