NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）酯和其他活化酯（磺基-NHS、磺基四氟苯基-STP）是适合氨基修饰的反应性化合物。NHS是最常见的活化酯类型。常见的修饰是荧光标记、荧光猝灭剂和其他报告基团。可以使用活化酯连接炔烃和叠氮基，以使生物分子适应点击化学。尤其常见的是蛋白质和肽的修饰，因为它们几乎总是含有氨基。其他例子是氨基寡核苷酸的修饰、氨基修饰的DNA和含氨基的糖。NHS酯与氨基的反应强烈依赖于pH值：在低pH值下，氨基被质子化，并且不会发生修饰。在高于最佳pH值时，NHS酯的水解速...

硫醇与马来酰亚胺的反应是广泛用于生物共轭和标记生物分子（包括蛋白质和肽）的过程。它按照以下方案进行：马来酰亚胺是对硫醇表现出高选择性的亲电子化合物。虽然马来酰亚胺在自然界中几乎不存在，但硫醇却非常丰富。它们以半胱氨酸残基形式存在于蛋白质和肽中。尽管天然DNA不含硫醇，但具有硫醇基团的合成寡核苷酸可以很容易地制备。硫醇易于氧化二聚并形成二硫键。因此，半胱氨酸残基形成二硫键，从而稳定蛋白质的三级结构。二硫化物不与马来酰亚胺反应。因此，有必要在缀合前还原二硫化物并排除反应中的氧气。...

Pico488DNA定量溶液是一种超灵敏试剂，用于在无法通过测量260nm吸光度来确定双链DNA浓度时测量双链DNA浓度。Pico488选择性地结合双链DNA，因此核苷酸、单链DNA、RNA、蛋白质和其他杂质不会妨碍测量。与双链DNA结合的染料在503nm处最大吸收光并在525nm处最大发射光。为了检测测定读数，可以使用任何类型的荧光计或荧光板读数器。Pico488测量DNA浓度的线性范围为1pg/μL—5ng/μL。为了实现精确、可重复的荧光测量，我们建议在TE缓冲液（10...

点击化学缓冲液适用于含有炔烃的寡核苷酸的合成后缀合。带有末端炔的寡核苷酸可以使用炔亚磷酰胺合成，或者您也可以在我们的网站上订购修饰寡核苷酸的合成。叠氮化物与修饰寡核苷酸的末端炔缀合，形成五元杂环。这两个基团（叠氮基和炔烃）在天然生物分子中都极为罕见，因此该反应具有高度特异性，可以有效地处理各种任务。该反应在铜(I)存在下、中性pH值下进行。催化缓冲液含有铜(II)、醋酸三乙铵pH7和DMSO。建议使用新配制的抗坏血酸溶液来还原铜(II)。对于此反应，您将需要炔烃修饰的寡核苷酸...

蛋白质标记缓冲液适用于CuAAC与蛋白质的反应，可保护生物分子免受活性氧的损害。该反应可用于具有炔烃或叠氮基团的蛋白质，以及用叠氮基团代谢标记的细胞或细胞裂解物的组分。叠氮化物与末端炔烃缀合，形成五元杂环（1,2,3-三唑）。这两个基团（叠氮基和炔烃）在天然生物分子中都极为罕见，因此该反应具有高度特异性，可以有效地处理各种任务。该反应在铜(I)化合物存在下进行，几乎不依赖于pH值。蛋白质标记缓冲液针对蛋白质操作进行了优化，含有铜(II)盐（催化活性铜(I)化合物的稳定前体）、...

细胞增殖测定广泛应用于细胞毒性研究、癌症研究和细胞生物学的许多其他领域。其中许多可以通过荧光标记对增殖细胞进行可视化，并且适合高通量筛选。检测复制的DNA可以说是检测增殖的最直接方法。这是通过使用溴脱氧尿苷(BrdU)核苷实现的，该核苷在复制过程中融入DNA。然后，细胞DNA中的这些核苷修饰可以通过抗BrdU抗体检测到。尽管具有特异性，但这种测定方法繁琐且难以重现，因为需要用刺激性试剂处理细胞，以使DNA暴露于抗体，否则这些抗体不会穿透细胞结构。一种更温和的替代方案是乙炔基脱...