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单宁含量测试盒

简要描述:单宁含量测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

单宁含量测试盒

微量法 100管/96样

正式测定前取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物,又称植物多酚。具有的化学性质和多种生理活性,如能与蛋白质、生物碱、多糖结合;能与多种金属离子发生络合或静电作用;具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。

测定原理:

单宁在碱性环境下与磷钼酸反应,生成蓝色化合物,在760nm处有最大吸收峰。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

试剂一:液体4mL× 1瓶,4℃保存;

试剂二:液体3mL × 1瓶,4℃保存;

单宁的提取: 

按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL蒸馏水),充分匀浆后转移到EP管中,80℃水浴提取30min, 8000 g,25℃离心10 min,取上清液待测。

测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至760nm处,蒸馏水调零;试剂一和试剂二37℃预热10min以上;

2、操作表:

试剂名称(µL)

对照管

测定管

样本


5

蒸馏水

135

130

试剂一

35

35

混匀,室温静置5min

试剂二

30

30

混匀,室温静置30min,760nm处读取吸光值A,ΔA=A测定-A对照,对照管只要做一管。

单宁含量计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

1、标准条件下测定的回归方程为y = 1.6418x +0.0134;x为标准品浓度(mg/mL),y为ΔA(A测定-A对照)。

2、按样本鲜重计算:

单宁含量(mg /g鲜重)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(W×V1÷V2)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷W。

3、按样本蛋白浓度计算:

单宁含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(V1×Cpr)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷Cpr。

V1:加入样本体积,0.005mL;V2:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。

b.用96孔板测定的计算公式如下:

1、标准条件下测定的回归方程为y = 0.8209x+0.0134;x为标准品浓度(mg/mL),y为ΔA(A测定-A对照)。

2、按样本鲜重计算:

单宁含量(mg/g鲜重)=[(ΔA-0.0134)÷0.8209×V1]÷(W×V1÷V2)=1.218×(ΔA-0.0134) ÷W。

3、按样本蛋白浓度计算:

单宁含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134)÷0.8209×V1]÷(V1×Cpr)=1.218×(ΔA-0.0134)÷Cpr。

V1:加入样本体积,0.005mL;V2:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。

注意:

  1. ΔA控制在0.02-0.5范围内,若ΔA大于0.5,将样本提取上清液用蒸馏水稀释10倍后检测,计算公式中乘以相应稀释倍数。

  2. 标准曲线线性范围为:0.025mg/mL-0.5mg/mL。


上海牧荣生物科技有限公司

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单宁含量测试盒



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