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果糖1,6二磷酸(FDP)测试盒

简要描述:果糖1,6二磷酸(FDP)测试盒 果糖-1,6-二磷酸(Fructose-1,6 Diphosphate,FDP)试剂盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

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  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-07
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详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

果糖1,6二磷酸(FDP)测试盒

微量法100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

果糖1,6-二磷酸是机体内的高能代谢物和代谢调控剂,是糖酵解途径的重要中间体,广泛存在于动植物和微生物体内,能影响细胞内钾离子的浓度,改善葡萄糖和其他能量底物的代谢,促进组织氧的释放,广泛应用于临床医药制剂。

测定原理

醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸降解,产物与DNPH缩合成紫红色物质,在540nm有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。

试剂组成和配制    

试剂一:液体110mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体0.4mL×1支,4℃避光保存。

试剂三:液体4mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂四:液体16mL×1瓶,4℃保存。

样品处理

  1. 组织:按照质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL试剂一)加入试剂一,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清待测。

  2. 细胞:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清待测。

  3. 液体:直接检测。

测定操作


对照管

测定管

样品(μL)


20

蒸馏水(μL)

20


试剂一(μL)

44

40

试剂二(μL)


4

充分混匀,37℃反应30min

试剂三(μL)

40

40

充分混匀,37℃温育10min

试剂四(μL)

160

160

充分混匀,于37℃温育10min,于微量石英比色皿/96孔板,蒸馏水调零,测定540nm处吸光值,记为A对照管和A测定管,△A=A测定管- A对照管,对照管只要做一管。

计算公式

  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y= 0.6971x+0.0012,R2=0.9983

1.按照质量计算

FDP(mg/g 鲜重)= (△A-0.0012) ÷0.6971÷(W÷V样总)

= 1.43×(△A-0.0012)÷W

2.按照细胞数量计算

FDP(mg/104 cell)= (△A-0.0012) ÷0.6971÷(细胞数量÷V样总)

=1.43×(△A-0.0012)÷细胞数量

3.按照液体体积计算

FDP(mg/mL)= (△A-0.0012) ÷0.6971

= 1.43×(△A-0.0012)

W:样本质量,g;V样总:加入提取液体积,1mL

  1. 用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y= 0.3486x+0.0012,R2=0.9983

1.按照质量计算

FDP(mg/g 鲜重)= (△A-0.0012) ÷0.3486÷(W÷V样总)

= 2.87×(△A-0.0012)÷W

2.按照细胞数量计算

FDP(mg/104 cell)= (△A-0.0012) ÷0.3486÷(细胞数量÷V样总)

= 2.87×(△A-0.0012)÷细胞数量

3.按照液体体积计算

FDP(mg/mL)= (△A-0.0012) ÷0.3486

= 2.87×(△A-0.0012)

W:样本质量,g;V样总:加入提取液体积,1mL

注意事项

*低检出限为1.72 mg/L。

上海牧荣生物科技有限公司

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果糖1,6二磷酸(FDP)测试盒





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