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超氧阴离子清除能力测试盒

简要描述:超氧阴离子清除能力测试盒 上海牧荣生物科技有限公司专业实验室产品.为客户全面解决实验、生产、开发需求,提供方便、快捷的服务。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2024-05-08
  • 访  问  量:54

详细介绍

品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药

超氧阴离子清除能力测试盒

微量法100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。

测定原理

AP-TEMED系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-与对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与530nm的吸光值呈负相关。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

试剂组成和配制

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体1.5mL×1支,4℃避光保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加6mL蒸馏水充分溶解。

试剂三:液体7.5mL×1瓶,4℃保存。

试剂四:液体7.5mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂五:液体7.5mL×1瓶,4℃避光保存。

样品处理

组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。

细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。

培养液或其它液体:直接检测。

粉剂药物可配制成相同浓度,比如1mg/mL。

测定操作


对照管

测定管

试剂一(μL)

10

10

试剂二(μL)

40

40

H2O(μL)

25


充分混匀,25℃反应1min

样品(μL)


25

试剂三(μL)

50

50

充分混匀,37℃反应30min

试剂四(μL)

50

50

试剂五(μL)

50

50

充分混匀,37℃显色20min,于微量石英比色皿/96孔板,在530nm处测定对照管和测定管的吸光值,分别记为A对照管和A测定管。

注意:对照管只需测定一次。

 

计算公式

超氧阴离子清除率 I%=

注意事项

  1. 试剂一4℃可保存2个月,配制好的试剂二4℃可保存一周,建议实验前配制,并尽快使用。

  2. 样品处理完后立即进行测定,或者低温保存不超过24小时。


上海牧荣生物科技有限公司

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超氧阴离子清除能力测试盒



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